ECC12人胃癌细胞

ECC12人胃癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，63岁

组织来源:胃

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% FBS +1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:4传代,3-4天传1代

来源与病理特征：

组织来源：源自人胃腺癌组织，属 弥漫型胃癌（Lauren分型），可能携带 低分化或印戒细胞癌特征（需病理复检确认）。

分子特征：

高频突变：TP53突变（＞70%）、CDH1（E-cadherin）缺失（与弥漫型胃癌强相关），需验证HER2扩增状态（免疫组化/FISH）。

标志物表达：CK18+（上皮标志）、MUC1+，部分亚群可能表达PD-L1（免疫治疗潜力）。

培养特性：

贴壁生长，细胞形态不规则，易形成松散集落，边缘浸润性明显。

增殖速度中等（倍增时间约40-48小时），需定期传代避免过度融合。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

转移机制：

研究CDH1缺失介导的 失巢凋亡抵抗（通过激活FAK/Src通路）。

脾脏注射建立 腹膜转移模型（模拟胃癌常见转移途径）。

治疗抵抗：

对5-氟尿嘧啶（5-FU）和奥沙利铂的敏感性测试（可能与TYMS或ERCC1过表达相关）。

免疫治疗评估：PD-1抗体联合化疗的协同效应（需检测微卫星不稳定性/MSI状态）。

靶向治疗开发

HER2靶向：若HER2阳性（IHC 3+或FISH+），可测试曲妥珠单抗联合帕妥珠单抗的双靶向策略。

Claudin 18.2靶点：适用于Claudin 18.2抗体（如Zolbetuximab）的临床前验证。

3. 培养与质控标准：

标准化操作

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% GlutaMAX + 10 mM HEPES（适应酸性微环境）。

传代要点：

消化时间：5-7分钟（0.25%胰酶-EDTA），镜下观察细胞间隙扩大后终止。

接种密度：3×10? cells/cm2（维持高活力）。

冻存：程序降温冻存液（90% FBS + 10% DMSO），液氮长期保存。

质控节点

分子验证：

季度检测CDH1缺失（Western Blot）及STR分型（比对JCRB/DSMZ数据库）。

功能检测：

腹膜转移模型构建（评估侵袭性，需4-6周）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。