DoTc24510人宫颈癌细胞

DoTc24510人宫颈癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:女性

组织来源:子宫颈

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM+10% Foetal Bovine Serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

来源与病理特征：

组织来源：源自人宫颈鳞状细胞癌（SCC）组织，属 HPV关联性肿瘤（需检测HPV16/18 DNA整合状态）。

分子特征：

HPV状态：HPV16阳性（E6/E7癌基因持续表达，导致p53/RB通路失活）。

标志物表达：p16INK4a强阳性（HPV感染标志）、CK5/6+（鳞状分化）。

高频突变：PIK3CA（E545K/H1047R）、TP53突变（若HPV阴性亚型）。

培养特性

形态：贴壁生长，细胞呈多边形或梭形，接触抑制弱，易形成多层克隆。

致瘤性：裸鼠皮下接种可成瘤（4-6周），模拟宫颈癌局部侵袭。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

HPV致癌机制：

研究E6/E7癌基因对端粒酶（hTERT）的激活及基因组不稳定性影响。

CRISPR敲除E6/E7基因，观察p53/RB通路恢复效应。

治疗抵抗：

顺铂耐药模型（可能与GSH代谢增强或ERCC1过表达相关）。

免疫治疗响应评估（PD-L1表达与CD8+ T细胞浸润相关性）。

临床前模型

类器官培养：3D模拟肿瘤微环境，测试放疗增敏剂（如PARP抑制剂）。

PDX模型：移植至小鼠宫颈部位，模拟原位肿瘤生物学行为。

3. 培养与质控标准：

标准化操作

培养基：DMEM/F12 + 10% FBS + 1% NEAA + 10 ng/mL EGF（维持上皮特性）。

传代要点：

消化时间：3-5分钟（0.25%胰酶-EDTA），终止时加入含10% FBS的培养基。

接种密度：2×10? cells/cm2（避免低密度停滞）。

冻存：程序降温冻存液（90% FBS + 10% DMSO），复苏存活率>85%。

质控节点

分子验证：

季度检测HPV16 E6/E7表达（qPCR）及STR分型（比对ATCC/DSMZ）。

功能检测：

Transwell侵袭实验（预铺Matrigel，评估MMP-2/9分泌）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。