COLO60H人结肠癌细胞

COLO60H人结肠癌细胞

基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，73岁

组织来源:结肠

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM:Ham's F12 + 3.1 g/L Glucose + 1.6 mM L-Glutamine + 15 mM HEPES + 1.0 mM Sodium pyruvate + 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion article number 820400a) + 10% fetal bovine serum (FBS)+1ύ䈠ύ

细胞特性：

来源与病理特征

组织来源：COLO-60H源自人结肠腺癌组织，属 低分化型，具有高度侵袭性和转移倾向（文献提示可能来自肝转移灶）。

分子特征：

高频突变：KRAS G12D/V（约80%概率）、TP53突变（需Sanger测序验证）。

微卫星状态：建议检测MSI（微卫星不稳定性），若为MSI-H型则对免疫治疗敏感。

标志物表达：CK20+/CDX2+（肠上皮分化），CEA分泌阳性。

培养特性

形态：贴壁生长，细胞呈梭形或多角形，易形成多层堆积。

致瘤性：裸鼠皮下接种后3-4周可形成肿瘤（体积≥500 mm3），伴肝/肺转移。

2. 核心科研应用

转化医学研究

转移机制：

研究Integrin αvβ6介导的EMT过程（通过划痕实验+RNA-seq验证）。

尾静脉注射建立 多器官转移模型（重点关注肝转移生态位）。

治疗抵抗：

奥沙利铂耐药模型（可能与ABCB1过表达相关）。

测试EGFR抑制剂（西妥昔单抗）在KRAS突变背景下的无效性。

药物开发

靶向联合策略：MEK抑制剂（曲美替尼）+化疗药物（伊立替康）的协同效应。

纳米载体评估：叶酸受体靶向的紫杉醇纳米粒递送效率测试。

3. 标准化培养体系

培养基与传代

培养基：DMEM高糖 + 15% FBS + 1% GlutaMAX + 10mM HEPES（适应高代谢需求）。

传代规范：

消化时间：3分钟（0.05%胰酶-EDTA），镜下观察细胞边缘回缩即终止。

接种密度：1×10? cells/cm2（维持对数生长期）。

冻存：程序降温冻存液（FBS:DMSO=9:1），复苏存活率>90%。

质控要点

分子验证：

季度检测KRAS突变（ARMS-PCR）和STR分型（比对DSMZ数据库）。

功能检测：

软琼脂克隆形成实验（评估致瘤性）。

皮下成瘤实验（每批次冻存前验证）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。