COLO 792人黑素瘤细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:62 岁，男性

组织来源:皮肤（脑转移）

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI 1640+10% Foetal Bovine Serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

细胞细胞溯源

组织来源：源自人皮肤恶性黑素瘤（原发灶或转移灶），属 侵袭性亚型，可能携带BRAF V600E或NRAS突变（需测序确认）。

关键标志物：

阳性表达：S100、Melan-A（黑素细胞分化标志），部分亚群表达PD-L1（与免疫逃逸相关）。

阴性标记：CK7/CK20（排除上皮来源混淆）。

遗传特性

高频突变：

BRAF V600E（约50%概率）或NRAS Q61突变（30%概率），需通过ARMS-PCR验证。

伴随CDKN2A（p16缺失）或PTEN突变（与靶向治疗耐药相关）。

染色体异常：7号染色体增益（含MET致癌基因）。

2. 核心研究应用

转化医学方向

靶向治疗耐药：

BRAF抑制剂（如维莫非尼）耐药机制研究（通过ERK通路再激活或表型转换）。

联合用药策略：BRAF抑制剂+MEK抑制剂（如达拉非尼+曲美替尼）。

免疫治疗响应：

评估PD-1抗体疗效（需检测PD-L1动态表达及T细胞浸润情况）。

构建人源化小鼠模型测试双免疫疗法（PD-1+CTLA-4抗体）。

转移机制

血行转移模拟：尾静脉注射建立肺/肝转移模型，分析CTNNB1（β-catenin）核定位的影响。

3D模型：Matrigel中培养模拟肿瘤微环境，研究CAFs（癌相关成纤维细胞）对侵袭的促进作用。

3. 培养体系与质控

标准化操作

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%非必需氨基酸（NEAA） + 10mM HEPES（维持pH稳定性）。

传代要点：

消化时间：4-6分钟（0.25%胰酶-EDTA），终止时加入含10% FBS的培养基。

接种密度：2×10? cells/cm2（低密度易导致生长停滞）。

冻存：程序降温冻存液（FBS:DMSO=9:1），液氮长期保存。

质控节点

分子验证：

季度检测BRAF/NRAS突变状态（ddPCR或NGS）。

STR分型比对ATCC/DSMZ数据库（排除交叉污染）。

功能检测：

体外侵袭实验（Transwell预铺Matrigel，评估MMP-2分泌）。

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