COLO 320HSR人结肠癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:55 岁，女性

组织来源:结肠

生长特性:半悬浮生长

细胞形态:圆形/上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:RPMI 1640+10% Foetal Bovine Serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

溯源与分子特征

起源：

源自人结肠腺癌（与COLO 320DM同源但表型不同），属 未分化型结肠癌，无神经内分泌分化特征。

独特标志：不表达神经内分泌标记物（CgA/Synaptophysin阴性），保留上皮标志物（如CK20）。

遗传特征：

高频突变：TP53突变（>90%）、APC基因截短突变（Wnt通路激活）。

染色体异常：8号染色体扩增（含MYC致癌基因）。

培养表型

形态：贴壁生长为主，细胞呈多边形或梭形，易形成致密单层。

致瘤性：裸鼠皮下成瘤速度快（3-4周可见明显肿瘤），但转移倾向低于COLO 320DM。

2. 核心科研价值

独特研究方向

Wnt/β-catenin通路研究：

因APC突变导致β-catenin核积累，是研究Wnt通路靶向药的理想模型。

可构建报告基因系统（如TOPFlash）实时监测通路活性。

化疗耐药机制：

对5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性低（可能与TYMS过表达相关）。

联合用药筛选（如奥沙利铂+Wnt抑制剂）。

应用场景

药物开发：测试Porcupine抑制剂（如LGK974）对Wnt信号通路的阻断效果。

基因编辑：CRISPR敲除TP53，研究其在基因组不稳定性中的作用。

3. 标准化操作体系

培养方案

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% GlutaMAX（减少代谢压力）。

传代规范：

1. 消化：0.25%胰酶（37℃, 2-3分钟），镜下观察细胞回缩后立即终止。

2. 接种密度：3×10? cells/cm2（避免密度过低导致生长停滞）。

3. 换液频率：每72小时（因代谢速率中等）。

冻存复苏：程序降温冻存（冻存液：90% FBS + 10% DMSO），复苏后24小时贴壁率>80%。

质控要点

分子验证：

每季度检测APC突变（Sanger测序）和β-catenin核定位（免疫荧光）。

STR分型比对ATCC CCL-220.1标准。

功能检测：

软琼脂克隆形成实验（评估致瘤性）。

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