CHL1人黑素瘤细胞

CHL1人黑素瘤细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:女性

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM+10% Foetal Bovine Serum

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

细胞特性：

1. 细胞系基础信息

来源与病理特征

组织来源：CHL-1源自人皮肤恶性黑素瘤（原发灶或转移灶），属于 上皮样黑素瘤 亚型，具有高侵袭性和转移潜能。

分子特征：

常见突变基因：BRAF V600E（需测序验证）、NRAS突变（约15-20%病例）。

标志物表达：S100阳性、HMB-45/Melan-A部分阳性（提示黑素细胞起源）。

培养特性

形态：贴壁生长，细胞呈梭形或多角形，易形成松散聚集。

致瘤性：可在免疫缺陷鼠（如裸鼠）中形成移植瘤，模拟临床转移过程。

研究应用方向

黑素瘤机制研究

转移机制：研究EMT（上皮-间质转化）相关通路（如TGF-β、Wnt/β-catenin）。

耐药性：探索靶向治疗（如BRAF抑制剂维莫非尼）的耐药机制。

药物开发与筛选

靶向治疗：测试BRAF/MEK抑制剂（如达拉非尼+曲美替尼组合）的敏感性。

免疫治疗：与PD-1/CTLA-4抗体联用，评估肿瘤免疫逃逸调控。

培养条件：

培养条件与实验要点

培养基与传代

推荐培养基：RPMI-1640 或 DMEM（高糖） + 10% FBS + 1%双抗。

传代建议：

消化时间：5-7分钟（0.25%胰酶-EDTA），传代比例1:3至1:5。

注意：CHL-1对胰酶敏感，建议加入胰酶抑制剂终止消化。

质量控制

STR鉴定：定期比对数据库（如ATCC或DSMZ），确保细胞身份。

支原体检测：每月用PCR或荧光法筛查。

4. 注意事项与替代模型

实验设计建议

动物模型：

皮下接种评估肿瘤体积；尾静脉注射模拟肺转移。

基因编辑：通过CRISPR构建BRAF突变修复模型，研究耐药性逆转。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。