二硫代苏糖醇27565-41-9

一、基本性质

• 化学名称：DL - 二硫苏糖醇（DL-Dithiothreitol）

• CAS 号：3483-12-3

• 分子式：C₄H₁₀O₂S₂

• 分子量：154.25 g/mol

• 物理性质：白色结晶性粉末，易溶于水、乙醇、丙酮，不溶于乙醚；熔点约 42-43℃，稳定性较好，但易被氧化，需避光、密封保存。

二、主要作用与用途

1. 还原二硫键
   能特异性还原蛋白质、多肽等分子中的二硫键（-S-S-），断裂为巯基（-SH），常用于：

• 蛋白质变性与复性实验（如 SDS-PAGE 中破坏蛋白质二级结构）；

• 维持酶的活性（部分酶需游离巯基保持活性）；

• 防止蛋白质分子间因二硫键形成聚合体。

2. 抗氧化保护
   作为强还原剂，可清除体系中的氧自由基，保护敏感生物分子（如 DNA、RNA、酶）免受氧化损伤，常用于细胞裂解、核酸提取等实验。
3. 其他应用

• 作为巯基化试剂，用于修饰蛋白质或核酸的巯基基团；

• 在抗体标记、蛋白质纯化等实验中调节反应体系的还原环境。

三、使用方法

1. 溶液配制

• 常用浓度：0.1-10 mM（根据实验需求调整，如 SDS-PAGE 中常用 50 mM）。

• 配制方法：称取适量 DTT，用去离子水或缓冲液（如 PBS、Tris-HCl）溶解，配制成储存液（通常 1-10 M，分装后 - 20℃冷冻保存，避免反复冻融）。

• 注意：DTT 溶液易被氧化，新鲜配制的溶液为无色，氧化后逐渐变为黄色，此时还原能力下降，需重新配制。

2. 实验中的典型应用

• SDS-PAGE 样品处理：在蛋白质样品缓冲液中加入 DTT（终浓度 50 mM），煮沸 5-10 分钟，使蛋白质充分变性并还原二硫键，确保电泳结果准确。

• 酶反应体系：加入低浓度 DTT（0.1-1 mM）维持酶的活性（如限制性内切酶、DNA 聚合酶等）。

• 蛋白质复性：在复性缓冲液中加入 DTT（0.5-5 mM），帮助变性蛋白重新折叠，减少错误二硫键的形成