胰蛋白酶溶液（1%）

胰蛋白酶溶液(1%)

简介：

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后，小肠内的肠肽酶会活化该酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶，能够继续活化更多胰蛋白酶原，这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作，它会将蛋白质水解为肽，进而分解为氨基酸，其最适温度约为 37℃。可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化，通常室温下 1min 左右就可以消化下大多数贴壁细胞

组成：

自备材料：

1、 PBS、Hanks 液或无血清培养液

2、 显微镜

3、 离心机

操作步骤(仅供参考)：

1、贴壁细胞的消化

①吸除培养液，用无菌PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。

②加入少量Trypsin solution，略盖过细胞即可，不同的细胞消化时间有所不同。

③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。

④如果发现消化不足，则加入Trypsin solution 重新消化。

⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。

2、组织的消化 不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

3、改良Tyrode's Solution(无钙)如果产生少许沉淀，可以加热溶解或过滤后使用，产生大量沉淀应弃用。

4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

注意事项：

1. 尽量减少反复冻融的次数，以免失效。

2. 在使用Trypsin solution 过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染。

3. Trypsin solution 消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。