大规模蛋白纯化服务内容
一、参数信息
纯化技术平台配备工业化级层析系统，支持多技术组合工艺：
1. 亲和层析：使用 5-50cm 直径层析柱（填料类型：Ni-NTA、Protein A/G、Strep-Tactin®），单次处理上样量可达 500mL-5L
2. 离子交换 / 疏水层析：搭载 Capto™/MabSelect™等高性能填料，实现电荷 / 疏水性差异蛋白的规模化分离
3. 膜层析技术：适用于高粘度样本快速除杂，配合切向流过滤（TFF）系统进行浓缩换液
处理规模
1. 样本体积：50mL-5L（对应粗提蛋白量 5mg-5g）
2. 成品产能：单次服务可纯化获得50mg-2g目标蛋白（依纯度要求及蛋白特性调整）
纯度与质控
1. 基础纯化：纯度≥90%（适用于工业酶原料）
2. 药用级纯化：纯度≥95%（符合 ICH Q6B 标准，提供 HPLC/SEC-MALS 检测报告）
3. 超高纯度定制：纯度≥98%（需三步以上层析工艺，含宿主蛋白（HCP）/ 内毒素检测）
工艺周期
1. 单标签亲和层析（500mL 样本）：3-5 个工作日
2. 三步组合工艺（亲和 + 离子交换 + 凝胶过滤）：7-10 个工作日
3. 含工艺放大验证（从 50mL 到 5L）：额外增加 3-5 个工作日
二、使用信息
服务流程
1. 预处理阶段：客户提供粗提样本（细胞裂解液 / 发酵上清），我方进行蛋白浓度、杂质水平预检测
2. 工艺开发：通过小试优化层析条件（填料选型、Buffer 配方、洗脱梯度），提供纯化回收率预评估报告
3. 规模放大：使用 AKTA Pilot/ÄKTA Pure 250 系统进行工业化层析，实时监控压力、流速、紫外吸收值等参数
4. 终端处理：完成超滤浓缩（10-100kDa 截留分子量）、无菌过滤（0.22μm）及冻干（可选西林瓶 / 铝箔袋包装）
适用场景面向生物制药（抗体药物中间体、重组疫苗抗原）、工业酶制剂（食品级蛋白酶、纤维素酶）、诊断试剂（抗原 / 抗体原料）的中试生产及量产前工艺验证。
客户需提供材料
1. 粗提样本（注明体积、保存条件、上游表达系统及标签类型）
2. 目标蛋白特性（等电点、分子量、稳定性耐受范围）
3. 特殊要求（如无动物源成分、GMP 级生产记录、生物安全等级 3 级样本处理）
三、注意事项
实验前
1. 建议粗提样本中目标蛋白占比≥10%（过低浓度可能导致纯化成本显著增加，需提前进行表达优化）
2. 膜蛋白 / 糖蛋白等复杂蛋白需提供纯化耐受条件（如去垢剂类型、温度限制）
实验中
1. 每 2 小时反馈层析图谱与关键参数，若出现回收率低于预期（＜50%）或杂质残留超标，需共同确认是否调整洗脱策略
2. 标签切除服务（如 TEV 酶切）需客户提供足量酶切试剂，且需额外预留 24 小时反应时间
实验后
1. 冻干成品建议在 - 20℃批量储存，液体样本（体积＞10mL）需分装至无菌容器并 - 80℃冻存，避免反复冻融
2. 提供 3 个月内免费工艺追溯服务（含层析原始数据、HCP 残留检测原始图谱）
合规与安全
1. 符合 GLP 规范，药用级纯化可提供工艺验证报告（含设备清洁验证、杂质残留检测方法学确认）
2. 生物安全样本（如重组病毒蛋白）需提前提交《特殊样本处理申请表》，签署三方安全协议
