重组肠激酶

产品概述

肠激酶（ Enterokinase ，EK）是一种高度特异性的丝氨酸蛋白酶，可以专一识别 DDDDK 序列并在赖氨酸残基的 C 端进行切割。本品为重组牛源肠激酶轻链片段，可以在较宽的 pH 范围（4.5-9.5）和温度范围（4 ~ 45℃)内进行有效切割。Vazyme提供有 His-tag 和无 His-tag 两种肠激酶 ，客户可结合应用场景和纯化去除工艺进行选择。

    产品优势

1 、产能充足：5吨级生产线多批次生产，批产达亿U级别，多批次生产验证质量稳定；

2 、GMP级：生产过程符合GMP要求；

3 、质量文件完整：可保障无动物源性、无外源性病毒污染等，质量文件齐全。

4、质检体系完善：配套专一性酶活、酶残留检测试剂盒，提供入场检支撑、杂质风险控制策略。

5、规格定制：规格可根据客户需求定制。

      产品信息

        保存条件

储存条件 ：-30 ~ -15℃ ;

复验期：24 个月。

产品应用范围

1 、用于切除重组蛋白 N 端融合标签；

2 、用于活化胰蛋白酶原；

3 、生物制药领域常用于重组蛋白 、多肽类药物的生产制备 ，例如 GLP-1 及其类似物等。

建议反应体系

重组 EK：200-2000 U 可酶切融合蛋白 ：0.1-1 g/L （ 1 L）；

反应时间：25℃反应过夜或者 24 h ，用 SDS-PAGE  或者  HPLC 检测酶切效果；

4℃反应酶切 ，需要将酶切时间延长至 48-64 h ，或增加  2-3 倍酶量。

注意事项

1 、在＞200 mM 咪唑 ，或＞200 mM NaCl ，或＞5%甘油条件下 ，酶切效果受影响 ，可将样品进行稀释或者透析 ，再进行酶切 。如果样品 溶液中含有上述成分中的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好的酶切效果。磷酸盐对 Enterokinase 发挥活性有影响 ，因此尽量避免酶切体系内磷酸盐的存在。

2 、本司生产的肠激酶比活高 ，使用过程中加量较少 ，可不考虑其除去 。如果确实需要去除 rEK ，建议的去除方法如下：

a.使用亲和层析 ，可以利用苯甲脒亲和填料纯化去除 ，由于肠激酶是一种丝氨酸蛋白酶 ，可以在纯化时与苯甲脒填料结合 ，从而达到 纯化目的；

b.使用离子交换填料 ，pH 8.0 条件下，肠激酶与 DEAE 填料结合 ，并且在0.15 M NaCl 中可以被洗脱 ，可以利用目的蛋白与肠激酶电 荷差异以及与 DEAE 填料的结合或洗脱的不同条件将二者进行分离；

c.本产品含有 His标签 ，可使用 Ni 柱亲和层析吸附去除。

3 、推荐反应体系是基于我司实验条件下所获得 ，使用时可根据实际情况进行调整。