总皂苷检测试剂盒(分光光度法50T/48S)

总皂苷（Saponin ）含量试剂盒说明书

                                                分光光度法 50管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义：

皂苷（Saponin）是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，主要分布于陆地高等植物中，也少量存在于海星和海参等海洋生物中。 许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷还具有抗菌的活性或解热、镇静、抗癌等有价值的生物活性。

测定原理：

使用超声波提取样品中的皂苷，利用香草醛-高氯酸显色体系测定总皂苷含量。

组成：

自备仪器和用品：

可见分光光度计、烘箱、水浴锅、移液器、1ml玻璃比色皿、高氯酸、乙酸、超声清洗器

总皂苷提取：

样本烘干，粉碎过筛，称取0.05g，加入1ml提取液，超声提取1h；8000g，25℃离心10min，取上清待测。

测定步骤

1、可见分光光度计预热30min以上，调节波长至589nm，蒸馏水调零。

2、测定管：取0.5ml上清，70℃挥发至干。加入0.2ml试剂一和0.8ml试剂二，55℃水浴20min。吸取200μl加入1ml玻璃比色皿中，再加入1000μl试剂三，充分混匀后，589nm下测定吸光度A1。

3、空白管：取0.5ml提取液，70℃挥发至干。加入0.2ml试剂一和0.8ml试剂二，55℃水浴20min。吸取200μl加入1ml玻璃比色皿中，再加入1000μl试剂三，充分混匀后，589nm下测定吸光度A2。计算△A= A1-A2。

总皂苷含量计算：

1.以齐墩果酸为对照品计算

标准状态下的回归曲线为：y = 0.0072x - 0.012，R2 = 0.9968，x为对照品浓度，μg/ml,y为吸光度△A。

总皂苷含量(μg/g干重)=（△A+0.012）÷ 0.0072×V样÷(V样÷V样总×W)

                        =138.89×（△A+0.012）÷W

1. 以人参皂苷Re为对照品计算

标准状态下的回归曲线为：y = 2.0466x - 0.0016，R2 = 0.9983，x为对照品浓度，mg/ml,y为吸光度△A。

总皂苷含量(μg/g干重)=（△A+0.0016）÷ 2.0466×V样÷(V样÷V样总×W)×1000

                        =488.62×（△A+0.0016）÷W

V样：加入样本体积，0.5ml；V样总：加入提取液体积，1ml；W：样本干重，g；1000，毫克到微克的换算系数。