CellROX Deep Red Reagent 活性氧检测探针，实验步骤

产品描述

CellROX Deep Red Reagent是一种用于检测活细胞或固定细胞内氧化应激水平的荧光探针，由西安强化生物科技开发。

该探针通过响应活性氧（ROS，如超氧阴离子、羟基自由基等）产生荧光信号，其氧化形式在深红/远红外光谱区呈现可检测的荧光，可用于多色荧光实验，减少与其他常见荧光染料（如FITC、Cy5）的光谱重叠。

该试剂具有可接受的光稳定性，可用于实时或长时间监测细胞内ROS水平。

使用方法

需要自行准备的材料

细胞和培养基

生理盐缓冲液（PBS，pH 7.2-7.6）

【可选】固定剂（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）

实验步骤

实验可用于任何细胞类型。

生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验，建议设置浓度梯度，以确定实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Deep RedReagent对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

用待测化合物处理细胞，孵育一定时间。

【注】：待测化合物处理后没有必要去除培养基。 加CellROX Deep RedReagent到细胞内使其终浓度为5µM，37℃孵育30min。 去除培养基，用PBS清洗3次。

【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Deep RedReagent染色2h内进行荧光信号检测。

【可选】此时可用NucBlue活细胞染料（一种细胞核复染剂）或其他复染剂如Hoechst 33342对细胞染色。

注意事项

浓度调整：需根据细胞类型调整浓度，避免染色过量或背景干扰。

对照设置：建议使用ROS清除剂（如NAC）验证信号特异性。

仪器要求：需配备远红光滤光片（如Cy5通道）或633 nm激光器（可用于流式细胞仪）。

该试剂对光和空气敏感，使用过程中不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。