确定细胞转染效率的高低非常重要，通过特异的核酸转染指示剂转染进入细胞核并结合两种染料，可以精确定量地分析转染效率及细胞毒性。
riboMONITOR®转染指示剂试剂盒包含3种染料：riboTRACER™ Green、NUCLEOstain™和DEADstain™，分别是用于检测成功转染细胞、全部细胞和死亡细胞。其中riboTRACER™ Green能够在转染后富集于细胞核，不依赖于siRNA或miRNA序列，可方便、快速、准确地定量分析细胞转染效率，以便对siRNA或miRNA转染条件做进一步优化。
产品优势
1、使用方便：仅需3步，荧光显微镜观察即可
2、准确定量：富集于细胞核，精确定量转染效率
3、毒性分析：可同时分析细胞毒性，优化转染试剂用量
哪种转染试剂适合您？
锐博生物提供从siRNA/miRNA、mRNA/长链RNA到蛋白质的全系列转染试剂，请根据下表确定适合您的转染试剂。
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siRNA/miRNA/质粒转染试剂 基因抑制效率高
| mRNA/长链RNA转染试剂 适用于原代细胞 | 蛋白质转染试剂 可实现高效转染 |
| riboFECT™ CP转染试剂 | riboFECT™ mRNA转染试剂 | riboFECT™ Protein转染试剂
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| 试剂规格 | 0.5ml, 1ml | 0.5ml, 2.5ml | 0.5ml, 2.5ml |
| 样品类型 | siRNA, miRNA | mRNA, 长链RNA | 蛋白质 |
| 转染效率 | 很好 | 很好 | 高达98% |
| 细胞活力 | 很好 | 很好 | 好 |
| 细胞毒性 | 超低 | 超低 | 几乎无细胞毒性 |
转染细胞系 （部分） | HeLa，A549，HEK293T，HCT-116， NIH/3T3，HepG2，HNE1， L6，5637，H-bc，HSC，C2C12， Sertoli，CNE-2，5-8F， HAEC，DRG，CF，THP-1，MEL， PBMC，NSC，MSC，U2OS | human fibroblasts， CHO-K1， B16-F10，HEK293 |
HEK293，B16-F10，COS-7， COLO 205，dendritic cells (DC)， H9c2，human fibroblasts (primary cells)， HUVEC (primary cells)， Jurkat，MC3T3-E1，MEF (primary cells)， microglia， mouse podocytes (primary cells)， NIH/3T3，SK-OV-3，U-373 MG
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技术支持
评价实验细胞系转染的难易度
不同细胞系的转染效率差异很大，如何鉴定目的细胞系是否适合转染是细胞转染实验的基本问题。通常用荧光标记的siRNA或miRNA进行相应的转染对照试验，但该类转染对照不均匀地分布于细胞各处，有时甚至会粘连成团，很难定量分析细胞的转染效率。riboTRACER™是细胞核富集的核酸指示剂，通过与细胞核染料结合，即可精确定量分析细胞转染效率和细胞毒性
图1 使用riboMONITOR®检测riboFECT™ CP转染siRNA于不同细胞系的转染效率
Cells transfected with riboTRACER™ Green (100nM) with riboFECT™ CP (5 µl/well),
fixed with PFA, stain with NUCLEOstain™ and DEADstain™, 20X of microscope.
评价转染试剂的转染效果与细胞毒性
不同的转染试剂的转染效果差别很大，不恰当地选择转染试剂使转染效率低下，甚至导致细胞的大量死亡。riboMONITOR®通过荧光定量检测成功转染的细胞、死亡细胞、全部细胞，实现了细胞转染效率和细胞毒性的同时评估。
图2 使用riboMONITOR® 转染指示剂检测3种转染试剂转染293T细胞的转染效果
Reagent L的转染试剂细胞毒性较大，易引起细胞大量死亡，Reagent X转染试剂的转染效率不高。
而riboFECT™ CP的转染效率较高，几乎无细胞毒性，能够顺利转染293T细胞。
优化转染条件，监测转染效果
转染试剂用量和细胞密度是转染实验成功的关键，确保转染效果的批次间的稳定性，是实验可重复性的重要保证。riboMONITOR® 通过结合细胞核染料，可快速检测出细胞的转染效率，优化最佳的转染试剂用量及细胞密度，确定最适宜的转染条件，以实现细胞的高效转染，减少实验中不必要的实验摸索。
A-B：采用0.4µl和1µl的Reagent L转染Hela细胞的转染效果及细胞毒性检测；
C-D：采用0.4µl和1µl的Reagent L分别进行4万和5万细胞的转染实验，结果表明采用1µl Reagent L，
4万细胞进行转染时转染效率最高（C），细胞毒性最小（D）
