| 名称 | OSW-1 |
| 描述 | OSW-1 demonstrates broad antiviral activity, with 1–30 nM suppressing HRV1B, HCoV-229E, and FIPV replication by 68.8–99.9% and 10 nM reducing SARS‑CoV‑2 by >99%, while 0.1 nM for 24 h depletes OSBP by 92% in airway epithelial cells and modulates innate immune gene expression. In colorectal cancer models, OSW-1 triggers RIP1/RIP3‑independent but MLKL‑required necroptosis, shows selective nanomolar cytotoxicity in CRC versus normal cells, and engages a p53/PUMA axis with ER stress and GSK3β/Tip60‑linked p53 K120 acetylation.OSW-1 can be used to analyze the OSBP-dependent antiviral mechanisms and MLKL-mediated immunogenic cell death research in oncology. |
| 体外活性 | 方法：将HRV1B感染的H1-HeLa细胞和MRC-5细胞以1、10或30 nM的OSW-1或DMSO处理；以TCID50/mL定量病毒复制，并以相对于DMSO的抑制百分比表示。
结果：OSW-1显著抑制HRV1B和HCoV-229E复制。 [4]
方法：将FIPV感染的CRFK细胞以1、10或30 nM的OSW-1或DMSO处理；以TCID50/mL定量复制，并以相对于DMSO的抑制百分比表示。
结果：OSW-1以剂量依赖方式显著抑制FIPV复制：1 nM为68.8%，10 nM为96.5%，30 nM为98.9%。 [4]
方法：将SARS-CoV-2感染的Vero E6细胞以10 nM OSW-1或DMSO处理；以TCID50/mL定量复制，并以相对于DMSO的抑制百分比表示；对照OSBP靶向化合物ITZ、THEV和TTP以10 μM测试。
结果：10 nM OSW-1显著抑制SARS-CoV-2复制超过99%，而10 μM的ITZ、THEV和TTP抗SARS-CoV-2活性较弱。 [4]
方法：将BCi-NS1.1人气道上皮细胞以0.1 nM OSW-1处理24小时（无毒性方案），与DMSO或未处理对照比较；于1–24小时通过Western blot检测OSBP与ORP4蛋白水平，并进行三次独立实验的定量分析。
结果：0.1 nM OSW-1处理24小时使OSBP蛋白较DMSO降低92%，在1–6小时影响很小，对ORP4无影响。 [4]
方法：BCi-ACE2细胞用0.1 nM OSW-1预处理24小时，三次洗涤去除化合物后感染SARS-CoV-2，并在无OSW-1/DMSO条件下孵育；于24、48、72 hpi以qPCR检测核壳蛋白mRNA并以TCID50/mL检测感染性病毒；72 hpi评估形态学。
结果：与DMSO相比，OSW-1预处理显著降低核壳蛋白表达并降低感染性病毒；72 hpi细胞形态相当，提示无毒性。 [4]
方法：BCi-NS1.1细胞以0.1 nM OSW-1处理24小时后洗脱，在洗脱后6或24小时进行qPCR检测先天免疫基因；相对DMSO的倍数变化在n = 3次实验中计算；Western blot证实OSBP下调。
结果：OSW-1诱导的OSBP下调显著提高IFNB1（1.94倍和2.76倍）、IFNL3（4.63倍和2.73倍）、CXCL10（4.96倍和6.88倍）和ISG15（1.24倍和1.13倍）于6和24小时，MX1于24小时提高2.23倍；CCL20（2.33倍）、IL1B（1.22倍）和IL6（1.53倍）仅在6小时上调；CCL2、CCL5、IL8无变化；IFNL1与IFNL2未检出。 [4]
方法：BCi-NS1.1细胞以0.1 nM OSW-1或DMSO预处理24小时，洗脱后以Poly IC（10 μg/mL）刺激或不刺激；于6和24小时进行qPCR检测细胞因子与干扰素相关基因；比较OSW-1 + Poly IC与DMSO + Poly IC。
结果：Poly IC在两组均显著诱导多种细胞因子与干扰素相关基因表达。6小时，OSW-1 + Poly IC相对DMSO + Poly IC显著降低CCL2（0.60倍）并提高CCL5（2.84倍）、CCL20（2.28倍）、IL1B（2.25倍）、IL8（3.77倍）、IFNL1（3.05倍）、IFNL2（2.15倍）和IFNL3（1.46倍），而IL6、IFNB1、CXCL10、ISG15、MX1无差异。24小时，OSW-1 + Poly IC显著降低CCL2（0.47倍）、CCL20（0.34倍）、IL1B（0.61倍）、IL6（0.41倍）和IL8（3.77倍），并提高CCL5（5.41倍）、IFNB1（10.59倍）、IFNL1（9.12倍）、IFNL2（25.36倍）、IFNL3（27.25倍）和MX1（1.98倍），而CXCL10与ISG15无差异。 [4]
方法：将HCT116结直肠癌细胞用OSW-1（0.5 nM）处理24小时，或与Necrostatin-1（20 μM）、necrosulfonamide（2 μM）和/或z-VAD-fmk（10 μM）合用；检测ATP水平，并对全细胞裂解物进行MLKL与p-MLKL（S358）Western blot，对20 μl培养上清检测HMGB1。
结果：OSW-1降低ATP并诱导p-MLKL及胞外HMGB1；necrosulfonamide抑制这些坏死性凋亡指标，而Necrostatin-1不阻断OSW-1作用。 [5]
方法：将RIP3−的HCT116细胞转染对照或RIP1 siRNA后，以OSW-1（0.5 nM）处理24小时；通过ATP水平、相关蛋白Western blot和结晶紫染色评估坏死性凋亡。
结果：敲低RIP1未能消除OSW-1诱导的坏死性凋亡，ATP耗竭和坏死性指标仍然存在。 [5]
方法：将LoVo细胞转染对照或RIP3 siRNA后，以OSW-1（0.5 nM）处理24小时；通过ATP、Western blot和结晶紫染色评估坏死性凋亡。
结果：敲低RIP3未能阻断OSW-1诱导的坏死性凋亡，提示其对RIP3不依赖。 [5]
方法：多种CRC细胞系与正常结肠上皮NCM356细胞以不同浓度OSW-1处理48小时；用MTS测定存活率并计算IC50。
结果：OSW-1对CRC细胞高度选择性：CRC细胞IC50为0.46–24.5 nM，而NCM356为0.85 mM（相差逾1000倍）；p53野生型CRC细胞的IC50显著更低。 [5]
方法：将HCT116细胞转染OSBP和/或ORP4或其siRNA后，以OSW-1（0.5 nM，24小时）处理；检测细胞活力、ER应激标志（p-eIF2α、GRP78、ATF4）、GSK3β/Tip60磷酸化、p53 K120乙酰化、PUMA、p-MLKL及HMGB1释放；并评估Salubrinal（5 μM）抑制ER应激的作用。
结果：OSW-1下调OSBP/ORP4蛋白并诱导ER应激、GSK3β/Tip60激活、p53 K120乙酰化、PUMA上调、p-MLKL与HMGB1释放；过表达OSBP/ORP4或加入Salubrinal可挽救存活并抑制p53 K120乙酰化、PUMA、p-MLKL与HMGB1。 [5]
方法：HCT116细胞用OSW-1（0.5 nM，24小时）处理后进行透射电镜观察内质网形态学。
结果：OSW-1导致内质网扩张与断裂，符合ER应激特征。 [5] |
| 体内活性 | 方法：将C57BL/6小鼠皮下接种5×10^5个MC38细胞（WT、p53-KO或PUMA-KO；每组n=9–10）。7天后每隔一天腹腔注射OSW-1（12.5 μg/kg）；评估肿瘤体积、体重、生存、主要器官组织学、肿瘤内蛋白标志、免疫细胞浸润以及肿瘤和脾脏中的TNFA/IFNB1 mRNA。
结果：在12.5 μg/kg下，OSW-1显著抑制WT MC38肿瘤生长，未见死亡、体重下降或主要器官明显细胞丢失；肿瘤抑制伴随p53与PUMA上调及p-MLKL而无caspase活化，CD3+、CD8+ T细胞与CD11c+ DC浸润增加，且肿瘤与脾脏中TNFA与IFNB1 mRNA上调；p53或PUMA敲除消除了抗肿瘤活性及相关坏死性/免疫原性效应。 [5]
方法：在携带MLKL敲除MC38肿瘤的C57BL/6小鼠中按上述方案给予OSW-1；评估肿瘤生长及肿瘤内HMGB1释放。
结果：MLKL敲除削弱了OSW-1的抗肿瘤活性，并降低MC38肿瘤中OSW-1诱导的核HMGB1释放。 [5]
方法：携带HCT116异种移植瘤的裸鼠接受最高15 μg/kg的OSW-1治疗，并递增至20 μg/kg。
结果：OSW-1在最高15 μg/kg时对HCT116异种移植瘤无活性；升至20 μg/kg导致动物死亡。 [5] |
| 存储条件 | Store under nitrogen,Keep away from direct sunlight,
Powder: -20°C for 3 years | In solvent: -80°C for 1 year
Shipping with blue ice/Shipping at ambient temperature. |
| 溶解度 | DMSO : 80 mg/mL (91.63 mM), Sonication is recommended
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| 关键字 | OSW-1 | OSW 1 |
