Nourseothricin (NTC) Sulfate 硫酸诺尔斯菌素/诺尔丝菌素

Nourseothricin (NTC) Sulfate 硫酸诺尔斯菌素

— 分子遗传学优越的筛选性抗生素

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链丝菌素 Streptothricin； clonNAT； 选择性抗生素；革兰氏阳性和阴性菌； 酵母菌和丝状真菌；植物； sat1基因； nat1基因；CAS：96736-11-7

诺尔斯菌素（Nourseothricin，缩写NTC），英文同义名Streptothricin和clonNAT，由诺尔斯氏链霉菌（ Streptomyces noursei）代谢产生的一种广谱型抗生素，因结构上具链丝菌素（Streptothricin，STs）化学基团，故归属于此类抗生素亚家族。天然产物提取的诺尔斯菌素（Nourseothricin）一般为ST-F和ST-D的混合物，具有极其宽广的抑制生长活性，原核生物如细菌；真核生物如包括白色念球菌在内的各种酵母菌、丝状真菌、原生生物、昆虫和植物【见下表格1】。诺尔斯菌素的作用机制是通过诱导mRNA错误编码，来抑制蛋白合成。

基于以上特性，诺尔斯菌素（Nourseothricin）是基因重组工程研究中非常优秀的选择性抗生素。抗性基因nat1最初从S. noursei分离所得，此基因能编码表达诺尔斯菌素N-乙酰转移酶，通过对诺尔斯菌素（NTC）上与糖基部分相连的ß-赖氨酸上的ß-氨基基团进行单乙酰化修饰，使得抗生素失活。研究发现，nat1基因在多种异质体系内发挥作用，使其在分子遗传学中是非常有价值的选择性工具。后面陆续发现具相同抗性机理的基因有：来自大肠杆菌E. Coli的基因stat1，stat2，stat3；来自链霉菌S. lavendulae的stat基因。另外，还有来自链霉菌S. albulus的新型sttH基因，作用机制不同，抗性在于编码表达异分支酸类型水解酶，能打开streptolidine内酰胺环上的酰胺键，将其转化成无活性的酸性产物。sttH基因抗性似乎只对酵母菌有活性，对细菌无效。

诺尔斯菌素（Nourseothricin，缩写NTC）具有以下应用优势：

1. 粉末或者液体的稳定性非常高。粉末+4℃保存10年有效，+20℃保存2年有效。
2. 粉末具非常高的水溶性（1g/L）；
3. 具非常低或几乎无背景抗性：因抗性蛋白仅在细胞内表达，不会在细胞培养基内被降解。
4. 不会与大量其他抗生素，如氨基糖苷类抗生素潮霉素B或遗传霉素G418发生交叉反应。
5. 不能用作诊疗抗生素，对临床上治疗的细菌微生物呈现出极弱抗性。因此与诊疗抗生素交叉反应很小。
6. 特别适用于酵母分子生物学研究。不像一些营养缺陷型选择性基因，诺尔斯菌素抗性不会影响酵母正常生长，能用于工程菌，或者缺少营养性筛选基因表达的野生菌。

NTC使用方法和推荐浓度：

储存液配制：称量1000mg诺尔斯菌素溶解于5ml去离子水充分溶解后，用0.22µm滤膜过滤除菌，即制备200mg/ml储存液，本溶液置于+4℃保存，至少4周稳定，不会有任何可见的活力损失。长期保存，分装冻存于-20℃.

建议筛选浓度：诺尔斯菌素在相对较低的浓度下即可有效用于重组工程菌的筛选，大多数有机体的筛选浓度多在50-200µg/ml区间内。具体可参考下表1。

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表1 诺尔斯菌素（NTC）最低抑制浓度和选择性浓度列表

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