动物用in vivo siRNA和化学修饰siRNA

动物用siRNA 是采用特殊化学修饰并且可以直接注射动物的in vivo siRNA，采用国际领先合成平台、专利工艺和质量控制体系，具有高效、特异、稳定、低毒的优势，动物用siRNA 可确保体内RNAi 实验更出色的完成。锐博生物的in vivo siRNA广泛应用于动物疾病模型关键基因靶标确认的研究中，如通过抑制致病基因表达治疗疾病。目前，全球范围已有上百种RNAi 药物进入临床研究，2018年第一个siRNA药物获得美国FDA批准上市，引领了核酸药的最新发展。锐博生物还提供上百种化学修饰的siRNA，帮助客户探索更多siRNA的功能应用。

常用化学修饰方式

图1  siRNA常用化学修饰位点和常用的化学修饰方式

常用siRNA化学修饰方式

给药方式与给药剂量参考

给药方法大致分为系统给药（如静脉给药、腹腔给药等）和局部给药（如皮下注射，玻璃体给药，鞘内给药等）。首先需要根据动物模型和实验方案，确定给药量和给药次数，然后计算出实验所需的总用量。需要根据不同的器官来选择给药方法，而给药量因不同给药方法和实验目的而异。如肝脏、肾脏、肌肉等常用静脉注射（系统给药）；而皮下肿瘤则常用到瘤内注射（局部给药）。对于in vivo siRNA，推荐系统给药每次注射5~20nmol/20g体重，局部给药则需每次注射1~5nmol/20g体重，给药频率往往是一周2~3次，可以根据实验研究目的灵活调整给药方案。

in vivo siRNA给药方式示意图

（如：口服、静脉注射、皮下注射、眼内注射、脑室内注射、肌肉注射、椎管内注射、皮内注射、淋巴腔注射、鼻腔注射、舌下注射、腹腔注射等）

口服给药：安全方便，经胃肠道吸收，这类化合物利用率最低；

腹腔给药：不存在胃肠道首过代谢，但依然存在肝脏首过代谢，生物利用率较高；

静脉给药：不存在吸收屏障和首过代谢屏障，生物利用度最高；

皮下注射和肌肉注射：经皮下和肌肉毛细管吸收，吸收没有静脉注射完全，但可避开胃肠道和肝脏首过代谢；

皮内注射：把siRNA药液注射入表皮和真皮之间，皮内注射吸收较慢；

脑内注射：精确注射药物进入大脑脑室或大脑特定组织，如海马体、黑质等，跳过药物吸收和血脑屏障，给药体积很小。

从生物利用度的角度，静脉给药最高，依次是静脉给药>腹腔>肌肉>皮下>口服。

动物实验文献案例结果

in vivo siRNA和对照siRNA稀释于水中，以20 mg/kg的剂量，每3天注射1次，连续给药7周，将胆固醇修饰的动物用CamK-A siRNA注射到荷瘤小鼠中，检测肿瘤大小，发现使用in vivo siRNA敲降CamK-A可显著降低肿瘤生长，巨噬细胞募集以及血管生成。
Sang L, et al. Molecular cell, 2018.

锐博生物in vivo siRNA 局部注射给药有效抑制肿瘤生长，分别注射PBS 和siRNA。
A：PBS 对照； B：in vivo siRNA  三天给药一次

通过瘤内注射的方式将胆固醇修饰的IFIT3 siRNA注射到SMMC-LTNM小鼠中，并用IFN-α治疗，测定肿瘤大小和血清AFP，发现IFIT3 siRNA处理减弱了IFN-α在肝癌中的抗肿瘤作用。
Yang Y, et al. Hepatology, 2017.

通过瘤内注射，将胆固醇修饰的动物用circMTO1 siRNA注射到HCC荷瘤裸鼠SMMC-LTNM中，测定肿瘤大小和血清AFP，发现肿瘤的生长明显加快，血清AFP明显增加。
Han D, et al. Hepatology, 2017.