CheKine? 活性氧（ROS）含量检测试剂盒（荧光法）

特点&优势• 利用超灵敏的荧光探针DCFH-DA 进行活性氧ROS检测
                 • 提供了详细的操作步骤
                 • 适合流式细胞仪和荧光显微镜检测活性氧水平

试剂盒组分• DCFH-DA (10 mM)
                 •PositiveControl(50mM)

使用中注意事项• 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。
• 混合或复溶组分时，避免产生气泡。
• 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。
• 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
• 阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM （推荐浓度50-200 μM，具体依细胞类型而定） 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
• 实验过程中，如果阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA，使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整，尽量缩短读片时的曝光时间，并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
• 活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品，并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
• 探针装载后，一定要洗净未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
• 尽量缩短探针装载后到检测所用的时间（刺激时间除外），以减少各种可能的误差。