单B细胞抗体开发服务-ACROBiosystems百普赛斯

平台简介

单B细胞抗体制备技术是一种快速开发单克隆抗体的新型技术，其基于流式细胞术（FACS）及其他检测分析平台完成单个B细胞的分选及抗体筛选。主要流程是通过FACS的荧光和基本光散射快速区分细胞特征从而高效地分选出目标单个B细胞，后续提取其RNA反转录得到cDNA，PCR获取不同的unique序列，筛选出的unique序列经重组可获得单克隆抗体序列，微量表达抗体并纯化后再通过ELISA及BLI等检测分析平台对抗体进行活性和亲和力分析，筛选出最佳抗体。

ACROBiosystems百普赛斯作为长期专注于生物药开发过程的全球化品牌，致力于提供可为客户缩短开发周期、减轻客户研发负担的多样化服务。与传统抗体开发技术相比，我们的单B细胞抗体开发服务平台不仅能实现对特定B细胞的高特异性筛选，还能够保留抗体重链和轻链的天然配对以提高抗体的亲和力和功能性。

平台优势

技术路线

1. 抗原制备。抗原纯度大于90%，根据不同类型靶点抗原需要3~20 mg；

2. 动物免疫及效价测定。根据抗体种属需求选择小鼠或兔进行免疫；

3. 单B细胞分选。取脾脏后，使用FACS进行单个B细胞分选；

4. 抗体序列分析及表达鉴定。采用单B细胞基因获取方法获得单B细胞的重轻链可变区序列。对抗体序列进行分析，获得所需的多个unique序列。将获得的unique序列进行基因合成并构建质粒，瞬转HEK293进行孔板表达，收集上清进行ELISA或BLI鉴定或进行阻断ELISA验证，筛选所需的阳性克隆；

5. 抗体小试、纯化及鉴定。将初筛的阳性克隆进行10 mL小试表达和抗体纯化，SDS-PAGE纯度分析，UV浓度测定，ELISA活性分析鉴定并使用夹心法进行PK Assay开发；

6. 抗体生产及PK Assay建立。选择优选的配对抗体进行大量生产，进行SDS-PAGE纯度分析，UV浓度测定，ELISA活性分析及PK Assay建立（标准曲线，灵敏度，基质干扰验证等），灵敏度满足药物临床PK分析要求。

服务内容

案例分享