真核表达非洲猪瘟P30/54蛋白，非洲猪瘟抗原，猪瘟抗原

非洲猪瘟真核表达P30/54蛋白，非洲猪瘟抗原，猪瘟抗原

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是一种严重危害养猪业的高度传染性、出血性疾病(Liess et al.1987)。

E2蛋白是猪瘟病毒的重要结构蛋白,也是猪瘟病毒的主要保护性抗原。基于其很好的免疫原性,

且能诱导机体产生高水平的病毒中和抗体,E2蛋白是CSF亚单位疫苗及相关检测技术开发理想的候选抗原。毕赤酵母表达体系具有分泌表达、真核修饰等优点,是E2蛋白理想的表达系统。

本研究以猪瘟病毒E2蛋白胞外区基因为模板,构建毕赤酵母表达载体pPICZαA-E2,并通过电转化获得毕赤酵母X-33菌阳性克隆,经SDS-PAGE、

western-blot鉴定筛选出E2蛋白表达菌株。通过探究诱导培养基pH、诱导剂浓度以及诱导时间使E2蛋白在摇瓶达到最佳表达量。

将培养基上清进行Ni NTA亲和层析、离子交换等纯化方法获得较纯E2蛋白,对其糖基化修饰、二聚体结构进行分析;并将纯化的蛋白免疫动物,根据血清学试验分析蛋白免疫原性。

结果表明,猪瘟病毒E2蛋白在毕赤酵母中成功分泌表达,且表达的E2蛋白为二聚体结构,具有糖基化修饰。血清学分析表明该蛋白具有良好的免疫原性。

表达载体： 杆状病毒载体 

蛋白纯度： 大于90%（SDS-PAGE电泳）

检测分子量:23.5kDa~33 kDa

品牌：PhyCell/费雪

标签：N-His

性状:液体

规格：0.1mg,0.5mg,1mg

该抗原可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。

蛋白载体:牛血清白蛋白/卵清白蛋白/匙孔血蓝蛋白BSA/OVA/KLH

物理性状：液体，避免反复冻融

来 源:Balb/c 小鼠

免疫层析效价： 1:40以上，偶联比大于1:60

蛋白浓度：＞1mg/ml，具体视批次而定

缓冲液：0.01M PBS PH7.4无防腐剂

储存条件：-20℃以下

稳 定 性： 冻融一次复检合格，有效期两年

本产品仅供研究使用，不适用于人类、治疗或诊断应用。