重组经典猪瘟病毒E2真核蛋白；CSFV-E2抗原；经典猪瘟抗原；猪瘟E2抗原

  重组猪瘟病毒E2真核蛋白；CSFV-E2抗原；猪瘟抗原

 猪瘟病毒(CSFV)的主要保护性抗原E2是由约370个氨基酸残基组成的囊膜糖蛋白(gP53)。

猪瘟病毒E2蛋白是诱导产生保护性中和抗体的主要抗原结构蛋白,是猪瘟病毒主要的免疫相关基因,

猪瘟（Infection with classical swine fever virus，简称CSF）是由猪瘟病毒（CSFV）引起的、发生在猪上的一种高度急性、热性、接触性传染病。猪瘟流行广泛，发病率、死亡率高。该病一年四季流行，

可对养猪业造成毁灭性的打击，是危害养猪业最严重的传染病之一。CSFV由4个结构蛋白(C、Erns、E1和E2) 和8个非结构蛋白(Npro、P7、NS2、NS3、NS4A、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B)组成。

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是一种严重危害养猪业的高度传染性、出血性疾病(Liess et al.1987)。

E2蛋白是猪瘟病毒的重要结构蛋白,也是猪瘟病毒的主要保护性抗原。基于其很好的免疫原性,

且能诱导机体产生高水平的病毒中和抗体,E2蛋白是CSF亚单位疫苗及相关检测技术开发理想的候选抗原。

毕赤酵母表达体系具有分泌表达、真核修饰等优点,是E2蛋白理想的表达系统。

本研究以猪瘟病毒E2蛋白胞外区基因为模板,构建毕赤酵母表达载体pPICZαA-E2,并通过电转化获得毕赤酵母X-33菌阳性克隆,经SDS-PAGE、

western-blot鉴定筛选出E2蛋白表达菌株。通过探究诱导培养基pH、诱导剂浓度以及诱导时间使E2蛋白在摇瓶达到最佳表达量。

将培养基上清进行Ni NTA亲和层析、离子交换等纯化方法获得较纯E2蛋白,对其糖基化修饰、二聚体结构进行分析;并将纯化的蛋白免疫动物,根据血清学试验分析蛋白免疫原性。

结果表明,猪瘟病毒E2蛋白在毕赤酵母中成功分泌表达,且表达的E2蛋白为二聚体结构,具有糖基化修饰。血清学分析表明该蛋白具有良好的免疫原性。

表达载体： pcDNA3.0载体在293细胞中表达

蛋白纯度： 大于95%（SDS-PAGE电泳）

品牌：Frostgen®沸雪 

规格：0.5mg,1mg

该抗原可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。

物理性状：液体，避免反复冻融

蛋白浓度：＞1mg/ml，具体视批次而定

缓冲液：0.01M PBS PH7.4无防腐剂

储存条件：-20℃以下

稳 定 性： 冻融一次复检合格，有效期两年

本产品仅供研究使用，不适用于人类、治疗或诊断应用。