SKO-007人骨髓瘤细胞

                            SKO-007人骨髓瘤细胞 百欧博伟生物

一、知识概述

骨髓瘤细胞是B-淋巴浆细胞系统恶性增殖所致一种肿瘤。其特点是骨髓中出现异常的浆细胞 (称为骨髓瘤细胞）的恶性增殖，并分泌某 种体液因子，使破骨细胞异常激活，造成溶骨性病变，引起骨痛和骨质破坏，贫血、肾功能损害、免疫功能异常。

二、产品信息

平台编号：Bio-133308

规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶

细胞信息：SKO-007

细胞名称：SKO-007人骨髓瘤细胞

产品类别：人源细胞系

生长特性：贴壁生长

培养体系：DMEM（高糖）+10%FBS

传代方法：1：2传代

细胞形态：上皮细胞样

冻存条件：无血清细胞冻存液保存条件：＞85%

传代方法：1:2传代

传代情况：2~3天换液

培养体系：温度：37℃ ，气相：95%空气 ，5%CO2

细胞描述：本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。

冻存条件：基础培养基+40%FBS+10%DMSO，液氮

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

三、细胞特点

骨髓瘤细胞具有以下几个特点：①稳定，易培养；②自身不分泌免疫球蛋白或细胞因子；③融合率高；④是次黄嘌呤磷酸核糖转化酶缺陷株，是制备单克隆抗体的B淋巴细胞杂交瘤技术中 最理想的脾细胞融合伴侣。

四、细胞收到后的处理方法

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松）

五、细胞培养步骤

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）

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