冬凌草甲素；28957-04-2；自制中药标准品对照品;科研实验;HPLC≥98%

冬凌草甲素对T细胞急性淋巴细胞白血病的抗白血病作用[Pubmed：25571712]

四川大雪雪包包薛班。2014年11月;45(6):903-7.

探讨冬凌草甲素对T细胞急性淋巴细胞白血病细胞系CEM的抗白血病作用。
方法与结果：
人T细胞急性淋巴细胞白血病细胞系CEM体外培养。使用改良的 MTT 测定法检查冬凌草甲素对 CEM 细胞的 50% 抑制浓度 （IC50）。使用光学显微镜观察细胞形态变化。通过流式细胞术分析评估药物治疗后CEM细胞凋亡的百分比。Western blot检测AKT/mTOR、RAF/MEK/ERK、STAT5信号通路的活性水平以及Bcl-2和BAX的表达水平。冬凌草甲素对CEM细胞的生长呈时间和剂量依赖性，处理72 h后冬凌草甲素的ICs0为（7. 37± 1. 99） μmol/L。用冬凌草甲素处理的CEM细胞的细胞膜变得不锋利，其中一些已经崩解。冬凌草甲素诱导CEM细胞凋亡和0、5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素处理24 h后细胞凋亡率百分比分别为（4. 8±2. 11）%、（19.03±12.54）%、（40.27± 3.31）/和（57. 23 ± 6. 69）%。冬凌草甲素抑制mTOR，P70S6,4EBP1，RAF的激活。ERK和STAT5信号转导蛋白在CEM细胞中被组成型激活，但冬凌草甲素对AKT激酶没有抑制作用。冬凌草甲素下调抗凋亡蛋白Bcl-2水平，上调促凋亡蛋白Bax的表达。
结论：
冬凌草甲通过抑制mTOR/P70/4EBP1、RAF/ERK和STATS信号通路的激活，下调Bel-2的表达和上调BAX的表达，在CEM细胞中发挥抗白血病作用。

冬凌草甲素抗胰腺癌作用的实验研究.[Pubmed：25566662]

钟耀才 2014年7月;37(7):1230-3.

研究冬凌草甲素在人胰腺癌细胞PANC-1中的凋亡作用，并探讨其潜在机制。
方法和结果：
采用MTT法测定细胞活力。Hoechst 33342染色后通过共聚焦激光扫描显微镜测定细胞凋亡，PI染色后通过流式细胞术分析。Western blot分析JNK和p38 MAPK信号通路蛋白的调控。 用冬凌草甲素处理24小时导致细胞活力以剂量依赖性方式显着降低。IC50值为49.80 μmol/L，持续24 h。用 50 μmol/L 和 80 μmol/L 冬凌草甲素处理 24 小时后，用共聚焦激光扫描显微镜观察到典型的凋亡细胞核改变，流式细胞术分析增加了 PANC-1 细胞的凋亡率。用80 μmol/L冬凌草甲素处理可下调JNK，p38蛋白的表达，增加p-JNK，p-p38的表达。此外，80 μmol/L冬凌草甲素处理降低了细胞凋亡途径中下游蛋白Caspase-9、Caspase-3和PARP的表达，并激活了Caspase-9的裂解。
结论：
冬凌草甲素可通过JNK和p38 MAPK通路蛋白诱导PANC-1细胞凋亡。

冬凌草甲素通过细胞凋亡抑制 BxPC-3 细胞生长。[Pubmed：25651847]

Acta Biochim Biophys Sin（上海）。2015年3月;47(3):164-73.

冬凌草甲素是一种从传统中草药Rabdosia rubescens中提取的ent-kaurene二萜类化合物，具有多种生物学和药学功能，已在临床上使用多年。虽然冬凌草甲素的抗肿瘤功能已被众多证据证实，但其抗癌机制尚未得到充分证明。
方法与结果：
本研究以胰腺癌细胞系BxPC-3为模型，通过检验其对细胞活力的影响，研究冬凌草甲素可能的抗癌机制。结果表明，冬凌草甲素以时间和剂量依赖性方式影响细胞活力。暴露于不同浓度的冬凌草甲素后，与未处理的细胞相比，BxPC-3细胞的生长速率和细胞周期停滞显著降低，表明其对增殖抑制的作用。Western blot分析的详细信号通路分析显示，低剂量冬凌草甲素处理通过上调p53和下调细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）抑制BxPC-3细胞增殖，导致细胞周期停滞在G2/M期。高剂量冬凌草甲素不仅在G2/M期阻滞BxPC-3细胞，而且在S期诱导细胞积累，可能是通过γH2AX上调和DNA损伤。
结论：
此外，我们的结果表明，在冬凌草甲素处理后，用碘化丙啶对细胞亚群进行染色。蛋白质定量显示，高剂量冬凌草甲素治疗后，裂解聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）表达增加，尤其是长期暴露后。伴随着 BxPC-3 细胞中失活 PARP 水平的增加，细胞凋亡引发剂 caspase-3 和 caspase-7 表达也显着增加，表明 caspase 介导的细胞凋亡导致细胞死亡。