零背景平末端克隆，不含多克隆MCS

CV17-Zero Background pTOPO-Blunt Simple Cloning Kit（零背景平末端克隆，不含多克隆MCS）

产品介绍：

       本制品和传统的T4连接酶原理不同，它利用了Topoisomerase可以在瞬间（几秒钟-几分钟）、高效（接近100%）连接DNA片段的原理采用本公司独创的工艺制成。 

1. 平末端PCR产物不需要先加A，在瞬间（几秒钟-几分钟）完成平末端PCR产物连接。 

2. 特制的新型载体质粒大小仅仅不到2kb，充分发挥了TOPO载体越小，可容纳片段越大的优势，最大限度提高了大片段连接效率；连接后质粒大小比传统载体小2kb以上，质粒越小，转化效率越高，极大的提高了各种片段连接后的转化子数量。 

3. 采用氨苄抗性载体只需10分钟复苏时间，比卡那抗性载体1小时复苏时间缩短6倍。 

4. 最快可以不用冰浴和热休克，室温5分钟内完成转化；无需1小时复苏，只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板最快只需15-20分钟。

5. 自杀基因零背景原理，无自连假阳性，无需繁琐蓝白斑筛选和菌落PCR筛选。大部分情况下随机挑一个克隆便是有插入的（接近100%）。

6. 连接长片段能力远超传统Blunt克隆载体，可连接长达10kb片段（例如连接5kb片段，也可能达到挑10个菌落，至少8个是有插入的效果），是新一代世界领先的简单、快速、零背景免筛选的TOPO Blunt平末端克隆载体。

本制品在克隆插入位点两侧不含多克隆酶切位点（Simple），需要时可在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行酶切时，酶切反应将不会受到载体上其它多克隆酶切位点影响，可大大提高酶切效率，增加亚克隆成功率。

注：本TOPO载体连接体系是按照10ml计算可以用20次，如果按照其它公司产品5ml计算，实际使用次数可以增加一倍，20次实际可用40次。 

使用该产品发表的部分文章：

CV17 Zero Background pTOPO-Blunt Simple Cloning Kit::

1. Cloning and Expression Analysis of Citrate Synthase(CS)Gene in Camellia oleifera. Bulletin of Botanical Research 2016, 36(4): 556-564

2. Cloning and expression analysis of a autophagy-related protein 8 encoding gene in Polyporus umbellatus. Chin Med Biotechnol 2016, 11(5): 415-419

3. Cloning and expression of three thaumatin-like protein genes from Polyporus umbellatus. Acta Pharmaceutica Sinica B 2017, 7(3): 373–380

4. Development and application of an allele-specific PCR assay for detecting T409C mutation of cyp51 gene linked with tebuconazole resistance in Villosiclava virens (rice false smut)  Canadian Journal of Plant Pathology 2017, 39(3)

5. LEA proteins from Gastrodia elata enhance tolerance to low temperature stress in Escherichia coli. Gene 2018, 646: 136-142

6. Complete genomic sequence of a novel macluravirus, alpinia oxyphylla mosaic virus (AloMV), identified in Alpinia oxyphylla. Archives of Virology 2018,  https://doi.org/10.1007/s00705-018-3879-62

7. Complete nucleotide sequence of jasmine virus H, a new member of the family Tombusviridae. Archives of Virology 2018, 163(3): 731-735

8. Analysis of the complete genome sequence of a potyvirus from passion fruit suggests its taxonomic classification as a member of a new species. Archives of Virology 2018, https://doi.org/10.1007/s00705-018-3885-8

9. Endogenous pararetrovirus sequences are widely present in Citrinae genomes. Virus Research 2018, https://doi.org/10.1016/j.virusres.2018.05.018

10. Molecular cloning, polymorphism, and expression analysis of the LKB1/STK11 gene and its association with non-specific digestive disorder in rabbits. Molecular and Cellular 2018,  https://doi.org/10.1007/s11010-018-3349-1