中国仓鼠卵巢细胞k1亚克隆系CM-LEE

产品名称:中国仓鼠卵巢细胞k1亚克隆系CM-LEE

中国仓鼠卵巢细胞k1亚克隆系CM-LEE收到货后处理

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）

中国仓鼠卵巢细胞k1亚克隆系CM-LEE培养步骤

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃

中国仓鼠卵巢细胞k1亚克隆系CM-LEE部分产品：

YS3377 b16f10plv/LUC 小鼠黑色素瘤+LUCB16F10-PLV/LUC-PURO

YS3378 293t/LUC 人胚肾细胞+LUC293T/LUC-puro

YS3379 u20s/LUC 人骨肉瘤细胞+LUCU20S/LUC-PURO

YS3380 hek293e/GFP 人胚肾细胞+E/GFPHEK293-e/GFP-puro

YS3381 hek293cop/GFP 人胚肾细胞+cop/GFPHEK293-cop/GFP-puro

YS3382 ramos/LUC 人B淋巴细胞瘤细胞+LUCRAMOS/LUC-PURO

YS3383 u937/LUC 人组织细胞淋巴瘤细胞+LUCU937/LUC-PURO

YS3384 siha/LUC 人子宫颈鳞癌细胞+LUCSIHA/LUC-PURO

YS3385 t47d/LUC 人乳腺癌细胞+LUCT47D/LUC-PURO

YS3386 rd/LUC 人横纹肌肉瘤细胞+LUCRD/LUC-PURO

YS3387 t98g/LUC 人胶质母细胞瘤+LUCT98G/LUC-PURO

YS3388 ncih226/LUC 人肺鳞癌细胞+LUCNCI-H226/LUC-PURO

YS3389 a498/LUC 人肾癌细胞+LUCA498/LUC-PURO

YS3390 cne2/LUC 人鼻咽癌细胞+LUCCNE2/LUC-PURO

YS3391 ho8910pm/LUC 人卵巢癌细胞+LUCHO8910PM/LUC-PURO

YS3392 mg63/LUC 人骨肉瘤细胞+LUCMG63/LUC-PURO

YS3393 hepg2co/GFP 人肝癌细胞+GFPhepG2-co/GFP-PURO

YS3394 7721co/GFP 人肝癌细胞+GFP7721-co/GFP-puro

YS3395 hbl1/LUC 人弥漫大B淋巴瘤细胞-荧光素酶标记HBL-1/LUC-PURO

YS3396 hep3b/LUC 人肝癌细胞-荧光素酶标记HEP3B/LUC-PURO

YS3397 caov3/LUC 人卵巢癌细胞-荧光素酶标记Caov3/LUC-PURO

YS3398 hek293tco/GFP 人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记HEK293T-CO/GFP-PURO

YS3399 hek293te/GFP 人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记HEK293T-E/GFP-PURO

YS3400 chok1co/GFP 中国仓鼠卵巢细胞-绿色荧光蛋白标记CHO-K1-CO/GFP-PURO

YS3401 tc1/LUC 小鼠肺上皮细胞+LUCTC-1/LUC

YS3402 u251mg/LUC 人类星型胶质瘤细胞+LUC-puroU251MG/LUC

YS3403 mkn7/LUC 人胃癌细胞+LUCMKN7/LUC

YS3404 msce/GFP/LUC 人脐带间充质干细胞-E/GFP/LUCMSC-E/GFP/LUC-PURO

YS3405 ncin87/LUCe/GFP 人胃癌细胞+LUCNCI-N87/LUC-E/GFP-PURO

YS3406 skhep1/LUC 人肝癌细胞+LUCSK-HEP-1/LUC

YS3407 msc/LUC 人脐带间充质干细胞/LUCMSC/LUC-PURO

YS3408 hgc27/LUCe/GFP 人胃癌细胞/LUC-E/GFPHGC27/LUC-E/GFP-PURO

YS3409 capan1/LUC 人胰腺癌细胞-荧光素酶标记Capan-1/LUC

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