人胚胎肾细胞HEK293S GnTI-

产品名称:人胚胎肾细胞HEK293S GnTI-

人胚胎肾细胞HEK293S GnTI-收到货后处理

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）

人胚胎肾细胞HEK293S GnTI-培养步骤

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃

人胚胎肾细胞HEK293S GnTI-部分产品：

YS3461 CCRFS180II 小鼠肉瘤成纤维细胞CCRFS180II

YS3462 351 小鼠杂交瘤细胞抗CD235.1

YS3463 FreestyleCHOS 中国仓鼠卵巢细胞Freestyle CHO-S

YS3464 SH2 小鼠B淋巴细胞白血病SH2

YS3465 H1Hela 人宫颈癌细胞H1 Hela

YS3466 IPECJ2 猪正常的肠上皮细胞IPEC-J2

YS3467 CHO/DHFR 中国仓鼠卵巢细胞CHO/DHFR

YS3468 MEL（MEL745AclDS19） 小鼠红白血病细胞MEL（MEL-745A cl. DS19）

YS3469 JAWSⅡ 小鼠骨髓（未成熟）树突状细胞JAWSⅡ

YS3470 ZFL 斑马鱼肝脏组织细胞ZFL

YS3471 GM12882 人B淋巴细胞GM12882

YS3472 GM01176 人成纤维细胞GM01176

YS3473 GM50142 人B淋巴细胞GM50142

YS3474 GM50113 人B淋巴细胞GM50113

YS3475 GM11404 人B淋巴细胞GM11404

YS3476 GM23465 人B淋巴细胞GM23465

YS3477 GM01359 人成纤维细胞GM01359

YS3478 AG09802 人B淋巴细胞AG09802

YS3479 GM21833 人B淋巴细胞GM21833

YS3480 VK2/E6E7 人阴道粘膜上皮细胞VK2/E6E7

YS3481 GM02008 人成纤维细胞GM02008

YS3482 GM11115 人成纤维细胞GM11115

YS3483 GM13325 人成纤维细胞GM13325

YS3484 GM09326 人成纤维细胞GM09326

YS3485 GM00526 人成纤维细胞GM00526

YS3486 GM50152 人B淋巴细胞GM50152

YS3487 H197/IGFIR 褐家鼠脑海马体成纤维细胞H19-7/IGF-IR

YS3490 EO771 小鼠髓样乳腺癌贴壁细胞EO771

YS3491 GM03606 唐氏综合症背景羊水来源细胞GM03606

YS3492 BB71 小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞BB7.1

YS3493 BBM1 小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞BBM.1

YS3494 L243 小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞L243

YS3495 4.00E+11 小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞4E11

YS3496 BB77 小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞BB7.7

YS3497 IGG6A6 小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞IGG-6A6

YS3498 93F10 小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞9.3F10

YS3499 NEGFP4C 小鼠神经干细胞NE-GFP-4C

YS3500 GM00325 人成纤维细胞GM00325

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