产品名称:大鼠血管内皮细胞RAOEC
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液(货号:C7001) |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养 |
大鼠血管内皮细胞RAOEC收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
大鼠血管内皮细胞RAOEC培养步骤
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃
大鼠血管内皮细胞RAOEC部分相关细胞如下:
YS2636 CMECs 大鼠心肌微血管内皮细胞CMECs
YS2637 LA4 鼠肺癌细胞LA4
YS2638 RAMSCs 大鼠脂肪间充质干细胞RAMSCs
YS2639 W256 Walker氏癌肉瘤256瘤株W256
YS2640 293C18293E 人胚肾细胞293C18293E
YS2641 ABE812 小鼠前B淋巴母细胞瘤细胞ABE8.12
YS2642 HP615 小鼠肺癌细胞HP615
YS2643 BEND 牛子宫内膜上皮细胞BEND
YS2644 H4IIE 大鼠肝癌细胞H4IIE
YS2645 L6TG 大鼠肌母细胞L6TG
YS2646 AMCHN8 人喉癌细胞AMCHN8
YS2647 HUSMC 人子宫平滑肌细胞HUSMC
YS2648 IOSE29 人卵巢上皮细胞IOSE29
YS2649 HemECs 人血管瘤内皮细胞HemECs
YS2650 NHEK 正常人表皮角质形成细胞NHEK
YS2651 HPMEC 人肺微血管内皮细胞HPMEC
YS2652 BAEC 牛主动脉内皮细胞BAEC
YS2653 HConEpic 人结膜上皮细胞HConEpic
YS2654 HD11 鸡巨噬细胞HD11
YS2655 RASMC 大鼠主动脉平滑肌细胞RASMC
YS2656 KTA7 人肺腺癌细胞KTA7
YS2657 alphaTC1clone6 鼠胰岛素瘤胰岛a细胞alphaTC1clone6
YS2658 RAOEC 大鼠血管内皮细胞RAOEC
YS2659 Walker256 大鼠腹水癌细胞Walker256
YS2660 HPDLF 人牙周膜成纤维细胞HPDLF
YS2661 CPAE 牛肺血管内皮细胞CPAE
YS2662 CPA47 牛肺血管内皮细胞CPA47
YS2663 NEC8 人畸胎瘤细胞NEC8
YS2664 HSAS3 人皮肤成纤维细胞HSAS3
YS2665 MMVECs 小鼠心肌微血管内皮细胞MMVECs
YS2666 OV2008 人卵巢癌细胞OV2008
YS2667 JKT1 人精原瘤细胞JKT1
YS2668 JG 小鼠肾小球旁细胞JG
YS2669 95C 人肺巨细胞癌细胞(低转移)95C
YS2670 697 人前B细胞白血病细胞697
YS2671 ML2 人急性髓单核细胞白血病细胞ML2
YS2672 WiDr 人结直肠癌细胞WiDr
YS2673 MCF12A 人乳腺癌细胞MCF12A
YS2674 EVSAT 人乳腺癌细胞EVSAT
YS2675 MDAMB435 人乳腺癌细胞MDAMB435
YS2676 SW1417 人结肠癌细胞SW1417
YS2677 KBM7 人慢性髓白血病细胞KBM7
YS2678 SUM149PT 人乳腺癌细胞SUM149PT
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