产品名称:人支气管上皮样细胞HBE
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液(货号:C7001) |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养 |
人支气管上皮样细胞HBE到货后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
人支气管上皮样细胞HBE培养步骤
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃
人支气管上皮样细胞HBE部分相关细胞如下:
YS2350 PANC02 小鼠胰腺癌细胞PANC02
YS2351 CT26WT/LUC 小鼠结肠癌细胞带荧光素酶CT26.WT/LUC
YS2352 B16/LUC 小鼠黑色素瘤带荧光素酶B16/LUC
YS2353 SW10 SW-10小鼠神经元细胞
YS2354 AT3 AT-3小鼠乳腺癌细胞
YS2355 OKT3 小鼠杂交瘤细胞(抗CD3)OKT3
YS2356 MOVAS 小鼠主动脉血管平滑肌细胞MOVAS
YS2357 EpH4Ev 小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev
YS2358 M1 小鼠肾集合管细胞(SV40转化)M-1
YS2359 mIMCD3 mIMCD-3小鼠肾髓质细胞
YS2360 GC2spg 小鼠精母细胞GC-2spg
YS2361 M5076 小鼠网织细胞肉瘤M5076
YS2362 B16F0 小鼠黑色素瘤细胞B16-F0
YS2363 4T1/GFP 小鼠乳腺癌细胞带绿色荧光4T1/GFP
YS2364 B16/GFP 小鼠黑色素瘤带绿色荧光B16/GFP
YS2365 G422/GFP 小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株带绿色荧光G422/GFP
YS2366 MFC/LUC 小鼠前胃癌细胞带荧光素酶MFC/LUC
YS2367 LLC/GFP 小鼠肺癌细胞带绿色荧光LLC/GFP
YS2368 B16/RFP 小鼠黑色素瘤带红色荧光B16/RFP
YS2369 RAW2647/RFP 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞带红色荧光RAW264.7/RFP
YS2370 293 人胚肾细胞293
YS2371 293A 人胚肾细胞293A
YS2372 F9 F9小鼠畸胎瘤细胞/小鼠胚胎癌细胞
YS2373 H9c221 大鼠心肌细胞H9c22-1
YS2374 MXY9K MXY9K[NBL-2]犬肾细胞
YS2375 P3X63Ag8 P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞
YS2376 HPNE 人胰腺导管细胞HPNE
YS2377 MC3T3E1Subclone24 MC3T3-E1Subclone24小鼠胚胎成骨细胞前体细胞
YS2378 3T6Swissalbino 3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞
YS2379 Psi2DAP Psi2DAP小鼠胚胎成纤维细胞
YS2380 SKNBE2 SK-N-BE2人神经母细胞瘤细胞
YS2381 L5178YTKclone372C L5178YTK+-clone3.7.2C小鼠淋巴瘤细胞
YS2382 PED PED猪内皮细胞
YS2383 CV1[PartoftheWistarSpecialCollection] CV-1[PartoftheWistarSpecialCollection]非洲绿猴肾细胞
YS2384 VEROC1008 VEROC1008[VeroE6]非洲绿猴肾细胞
YS2385 HifiveBTITN5B14 Hi-fiveBTI-TN-5B1-4昆虫细胞
更多细胞请咨询我们:人支气管上皮样细胞HBE