产品名称:犬肿瘤成纤维细胞A72
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液(货号:C7001) |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养 |
犬肿瘤成纤维细胞A72货后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
犬肿瘤成纤维细胞A72培养步骤
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃
犬肿瘤成纤维细胞A72相关细胞如下:
YS2124 CA2F1 小鼠杂交瘤细胞CA2F1
YS2125 CA1A9 小鼠杂交瘤细胞CA1A9
YS2126 CA6B10 小鼠杂交瘤细胞CA6B10
YS2127 TGHAVSMC 人主动脉平滑肌细胞TGHAVSMC
YS2128 KYSE450 人食管鳞癌细胞KYSE450
YS2129 HTR8Svneo 人胚胎滋养细胞HTR8Svneo
YS2130 MA10 小鼠睾丸上皮样细胞MA10
YS2131 NE4C 小鼠脑神经干细胞NE4C
YS2132 L2 大鼠肺上皮细胞L2
YS2133 A72 犬肿瘤成纤维细胞A72
YS2134 HIEC6 人小肠上皮细胞HIEC6
YS2135 FHs74Int 人小肠上皮细胞FHs74Int
YS2136 HEK293F 人胚肾细胞-F克隆HEK293F
YS2137 HEK293EBNA 稳定表达EBNA1的人胚肾细胞HEK293EBNA
YS2138 3T3Swissalbino 小鼠胚胎成纤维细胞3T3Swissalbino
YS2139 ZR7530 人乳腺导管癌细胞ZR7530
YS2140 LL2(LLC1) 小鼠肺癌细胞LL2(LLC1)
YS2141 EPC 鲤鱼上皮细胞/胖头鲦鱼上皮细胞EPC
YS2142 BABLC1 BABL/C1小鼠14天胚胎成纤维细胞BABLC1
YS2143 EBVHuman EBV-转化人淋巴细胞EBV
YS2144 KM9304 EBV-转化人淋巴细胞(彝族)KM9304
YS2145 MLA144 MLA144长臂猿淋巴瘤细胞MLA144
YS2146 WGHL1 白化金黄地鼠肺成纤维细胞WGHL1
YS2147 ZF4 斑马鱼细胞ZF4
YS2148 CP88 草鱼胚胎细胞CP88
YS2149 ZC79001 草鱼吻皮细胞ZC79001
YS2150 RL1 大鼠肺成纤维细胞RL1
YS2151 REM 大鼠胚肌细胞REM
YS2152 RES 大鼠胚皮肤成纤维细胞RES
YS2153 PtK1 袋鼠肾细胞PtK1
YS2154 PtK2 袋鼠肾细胞PtK2
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