1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)测定试剂盒/24样

1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)测定试剂盒/24样

测定原理：

在 Rubisco  的催化下，1  分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与 1  分子的 CO2   结合，产生 2  分子的 3-磷酸甘油酸(PGA) ，PGA  可通过外加的 3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用，产生甘油醛-3-磷酸，并使还原型辅酶Ⅰ(NADH)氧化。因此，340nm 吸光度的变化可计算还原型辅酶Ⅰ氧化速率，还原型辅酶Ⅰ氧化速率可反映 Rubisco   的活性。

自备仪器和用品：

可见-紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml  石英比色皿、研钵、冰、蒸馏水。

测定步骤：

1、分光光度计预热 30min   以上，调节波长至 340nm,蒸馏水调零。

2、样本测定：

工作液的配制：临用前将试剂二和试剂三 1:1   混合，用多少配多少；在 1ml   石英比色皿中，加入 50ul样本、50ul  试剂四和 900ul  工作液，立即混匀，记录△340nm   处 20s   时吸光值 A1  和 5min20s   时的吸光值 A2，计算 A=A1-A2。