6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)试剂盒(WST-8法)微板法/96样 新品

6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)试剂盒(WST-8法)微板法/96样

产品简介：

6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH；EC 1.1.1.49）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是磷酸戊糖途径的关键酶，同时维持 NADPH 在细胞内的水平， NADPH 反过来维持细胞中谷胱甘肽的水平进而保护细胞免受氧化损伤。因此 G6PDH 活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。G6PDH催化6-磷酸葡萄糖氧化为 6 -磷酸葡萄糖酸内酯，同时将NADP+还原为NADPH，传统方法是检测NADPH在340nm处的吸光值。由于NADPH的摩尔消光系数（ε）较低，所以这种方法灵敏度低，且严重受到干扰。
本试剂盒提供一种简单，灵敏，快速的测定方法：该酶促过程产生的NADPH与特异的显色剂反应，产生在450nm处有大吸收峰的有色物质，通过检测该有色物质在450nm的增加速率，进而计算出G6PDH酶活性的大小。

试剂盒组成和配制：

[注]：粉剂量在 mg 级别，使用前用手甩几次或者进行离心，打开直接加入要求的试剂即可。

所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰。

6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

样本制备：

① 组织样本：
称取约 0.1g 组织，加入  1mL  提取液，进行冰浴匀浆。 12000rpm  ，4℃离心  15min，

取上清，置冰上待测。

[注]：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为  1 ：5~10 的比例提取。

② 细菌/细胞样本：

先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入  1mL 提取

液；超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔  10s，重复  30次）；

4ºC 约  12,000rpm 离心  10min，取上清作为待测样品。

[注]：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为  500~1000：1  的比例进行提取。

③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清液检测。