γ-谷氨酸激酶(γ-GK)试剂盒微板法/48样 新品

γ-谷氨酸激酶(γ-GK)试剂盒微板法/48样

产品简介：

γ -谷氨酸激酶(γ -GK， EC 2.7.2.11)是脯氨酸生物合成途径中的关键酶之一。催化由谷氨酸生成脯氨酸途径的第一步反应。

本试剂盒利用γ-GK 催化谷氨酸磷酸化，进一步与转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与 Fe3+形成  Hydroxamate-Fe3+复合物 ，通过检测该复合物在  535 nm 波长处的OD 值，进而得出γ-GK酶 活 力 大 小 。 该 酶 催 化 的 反 应 方 程 式 ：ATP+L-glutamate=ADP+L-glutamate

5-phosphate。

试剂盒组成和配制：

所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、水浴锅、离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。

γ-谷氨酸激酶(γ-GK)活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

样本制备：
①组织样本：

取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，冰浴匀浆， 12000rpm ，4℃离心 10min，取上清液

待用。
[注]：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为 1 ：5~10 的比例进行提取。

②细菌/真菌样本：

先收集细菌/真菌到离心管内，离心后弃上清；取500万细菌/真菌加入1mL 提取液；

冰浴超声波破碎细菌/真菌(冰浴，功率20%或200W, 超 声 3s,间 隔 1 0s,重 复 3 0 次 ) ; 12000rpm,4℃  离 心 1 0min,   取上清，置冰上待测。

[注]: 若增加样本量，可按照细菌/细胞数量(104个):提取液体积(mL)  为500~1000:1的比例进行提取。

③液体样本：澄清的液体样本直接检测，若浑浊则离心后取上清液检测。