aladdin 阿拉丁 T489304 T7 RNA Transcription Enzyme Mix 医药级

中文名：T7 RNA Transcription Enzyme Mix

英文名：T7 RNA Transcription Enzyme Mix

纯度：医药级

货号：T489304

包装：10000t、1000t、50t

存储温度：-20°C储存

产品介绍：

产品描述

作为生物大分子，mRNA只能通过体外转录（IVT，in vitro transcription）的方法大规模合成，T7启动子是目前转录效率最高的启动子之一，因此采用T7 RNA聚合酶（T7 RNA Polymerase）进行体外转录可获得更多的合成产物。T7 RNA Transcription Enzyme Mix进行了转录反应体系的优化，从模板DNA T7启动子下游开始合成与DNA中一条链互补的RNA，简单快速获得大量的RNA分子。一个反应可以转录高达150-200μg的RNA，转录合成的RNA可用于诸如mRNA疫苗的制备、RNA结构与功能研究、RNA酶保护、探针杂交、RNAi、显微注射及体外翻译等多方面的下游应用。

T7 RNA Transcription Enzyme Mix组成原酶利用大肠杆菌大规模发酵表达，采用药用规格原辅料生产，并严格控制宿主蛋白质残留、核酸残留等，符合GMP规范的产品生产与质量管理规程保障生产过程及所有原辅料可追溯。

质量要求

遵循以下规范生产

1. ISO 9001:2015, certified facility。

2. 《GMP附录-细胞治疗产品》国家药品监督管理局。

3. 《人用基因治疗总论-中国药典2020》国家药典委。

4. USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products用于细胞治疗，基因治疗和组织工程产品中的辅料。

5. USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing 细胞治疗产品生产过程中细胞因子和生长因子。

6. Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products用于生产细胞或基因治疗药物的生物来源原料。

产品用途

1) 合成单链RNA，用于mRNA疫苗制备；

2) 合成高特异性RNA探针；

3) 合成siRNA前体；

4) 制作RNA剪接反应（RNA splicing）的前体。

保存温度

-20±5 ℃。

注意事项 

 1. 模板效率和孵化时间：

本试剂盒以1μg的模板投入量可以产生150-200μg的RNA，然而，不同模板的产量会因模板的序列、结构、长度、纯度以及特定RNA聚合酶启动子的序列和长度而有所不同。影响转录产量的污染物包括核糖核酸酶或污染物，如苯酚、微量金属和SDS。

2. 优化的反应:

推荐的反应条件可适用于大多数模板的体外转录，但是，对于某些模板，可以通过延长反应时间(4小时-过夜反应)，增加模板的用量来提高产率。

3. 模板含量：

下表总结了我们在调控模板数量方面的经验。结果可能因使用的模板而异，将反应时间延长至4-6小时可增加RNA的产量。

4. 保持RNase-free环境：

使用无RNase管和移液枪；

处理含有RNA的试剂盒组件或样品时应戴手套，并经常更换手套，特别是接触到RNase的潜在污染源，如门把手、钢笔、铅笔和人体皮肤后。

不使用时，应将所有试剂密封好。在孵育过程中，将所有含有RNA的试管密封。

5.  由于10×Transcription Buffer浓度偏高，高盐环境会导致聚合酶失活，同时buffer中含有亚精氨成分，会与模板DNA形成沉淀，配制反应液时需调整组分加样顺序，计算好体系，先加水，然后加buffer，NTP，最后加模板和酶，以防止10×的高浓度盐离子对酶造成影响。

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