产品名称：热启动Taq DNA 聚合酶

规格或纯度：EnzymoPure™, 5U/μL

产品介绍：

产品说明：

Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration是一种适体基团修饰的耐热性TAQ DNA聚合酶，高温加热前，适体修饰基团与Taq酶结合，抑制聚合酶的活性，避免了引物延伸的非特异性扩增或引物二聚体的产生，增强了DNA扩增的特异性、灵敏度和稳定性，可广泛适用于常规PCR、多重PCR及巢式PCR等。经过95℃热激10min后，该酶即可恢复活性。此外 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration没有检测到3'→5'校对外切酶活性，但具有5'→3'外切酶活性，可用于荧光定量PCR的检测。Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration在常温下没有活性，便于PCR实验的常温操作。

产品内容：

1.  Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration (10 U/μl )

2.  5×Hotstart Taq Buffer（ Mg²⁺ Plus）

3.  Solution I (10×)

活性定义：74℃，30 min，使 10 nmol dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为 1 个活性单位。

使用方法：

1. PCR 反应体系的设置：

a. 溶解并混匀 PCR 反应所需的各种溶液。并放置于冰浴上或冰盒内。建议反应 PCR 液体分装使用，避免反复冻融。

b. 参考下表设置 PCR 反应,建议 PCR 反应体系的配置在冰浴或在冰盒上进行：

※ 模板 DNA 用量:为了保证反应的灵敏性，25 μl 体系使用 10⁴ 拷贝的靶序列作为模板，可参考下表计算需加入 PCR 体系的模板量。

1 μg 各种来源的 DNA 对应的摩尔数

例如：纯化的人类基因组 DNA 浓度为 1 μg/μl，某基因在人类基因组中拷贝数为 10，其单位体积拷贝数为： 

3.0× 10⁵ mol/μg × 1 μg/μl × 10 copy/mol
=3.0× 10⁶ copy/μl
1× 10⁴ copy/ (3.0× 10⁶ copy/μl)
= 1/300 μl

即：1/300 ul 浓度为 1 ug/μl 的人类基因组 DNA 中含 10⁴ 拷贝该基因，稀释 300 倍后加 1μl 至 25 μl PCR 体系。为保证反应的特异性，DNA 终浓度应小于 10 ng/ul，过多的 DNA 可能会出现涂抹带甚至无特异性条带。

c. 用移液器轻轻吹打混匀或轻微 Vortex 混匀，室温离心数秒，使液体积聚于管底。

d. 各设置好的 PCR 反应管置于 PCR 仪上，开始 PCR 反应。

2. PCR 反应参数的设置：

本产品是经过适体修饰型 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration，为了使 PCR 的扩增效率、定量精度等达到最佳，建议热激时间为 95℃ ，10 分钟

3.产品包装：

级别：EnzymoPure™

浓度：5U/μL

储存温度：-20°C储存

运输条件：超低温运输

酶学委员会编号：2.7.7.7

单位定义：74℃，30 min，使 10 nmol dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为 1 个活性单位

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