人EBV转化淋巴细胞系AKATA

产品名称：人EBV转化淋巴细胞系AKATA

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人EBV转化淋巴细胞系AKATA收到后处理

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）

人EBV转化淋巴细胞系AKATA培养步骤

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃

人EBV转化淋巴细胞系AKATA部分相关细胞如下：

YS1431KMH2人甲状腺癌细胞KMH2

YS1432 C643 人甲状腺癌细胞C643

YS1433 SUM159PT 人乳腺癌细胞（三阴性）SUM159PT

YS1434 OVCA429 人卵巢癌细胞OVCA429

YS1435 921 人葡萄膜黑色素瘤92.1

YS1436 WM2664 人黑素瘤细胞WM2664

YS1437 SW756 人子宫鳞状癌细胞SW756

YS1438 WSUHN30 人口腔鳞状癌细胞WSUHN30

YS1439 Kyse510 人食管癌细胞Kyse510

YS1440 Colo16 人皮肤鳞状细胞癌细胞Colo16

YS1441 HCET 人角膜上皮细胞系HCET

YS1442 MEC1 人慢性B细胞白血病细胞MEC1

YS1443 AMO1 人骨髓浆细胞瘤株AMO1

YS1444 SF126 人脑瘤细胞SF126

YS1445 CCD1095Sk 人乳腺浸润性导管癌旁皮肤成纤维细胞（有限细胞系）CCD1095Sk

YS1446 MSTO211H 人肺癌细胞/胸膜双相间皮瘤细胞MSTO211H

YS1447 NCIH526 人小细胞肺癌NCIH526

YS1448 HMY1 人黑色素瘤细胞HMY1

YS1449 HT29MTXE12 人结肠癌细胞HT29甲氨蝶呤诱导分化成熟杯状细胞HT29MTXE12

YS1450 MO313 人少突胶质细胞MO3.13

YS1451 LUVA 人肥大细胞系LUVA

YS1452 AKATA 人EBV转化淋巴细胞系AKATA

YS1453 OE33 人食管腺癌OE33

YS1454 ARD 人多发性骨髓瘤细胞ARD

YS1455 COLO201 人结直肠腺癌细胞COLO201

YS1456 SACC83 人涎腺腺样囊性癌细胞SACC83

YS1457 SACCLM 人涎腺腺样囊性癌细胞高转移SACCLM

YS1458 Panc0813 人胰腺癌细胞Panc0813

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