产品名称:人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞MUM2B
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液(货号:C7001) |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养 |
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞MUM2B收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞MUM2B培养步骤
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞MUM2B部分相关细胞如下:
YS1227 MUM2B 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞MUM2B
YS1228 MV411 人慢性骨髓单核细胞性白血病MV411
YS1229 NALM6 人前B急性淋巴细胞白血病细胞NALM6
YS1230 NCCIT 人畸胎癌细胞NCCIT
YS1231 NCIH1299 人非小细胞肺癌细胞NCIH1299
YS1232 NCIH1395 人肺腺癌细胞NCIH1395
YS1233 NCIH1437 人肺腺癌细胞NCIH1437
YS1234 NCIH146 人小细胞肺癌细胞NCIH146
YS1235 NCIH157 人非小细胞肺腺癌细胞NCIH157
YS1236 NCIH1650 人肺支气管癌细胞/微浸润肺腺癌NCIH1650
YS1237 NCIH1688 人经典小细胞肺癌细胞NCIH1688
YS1238 NCIH1703 人肺癌细胞/鳞癌NCIH1703
YS1239 NCIH1944 人肺腺癌细胞NCIH1944
YS1240 NCIH1975 人肺腺癌细胞NCIH1975
YS1241 NCIH2009 人肺腺癌细胞NCIH2009
YS1242 NCIH2126 人非小细胞肺癌细胞/巨细胞肺癌NCIH2126
YS1243 NCIH2228 人非小细胞肺癌细胞NCIH2228
YS1244 NCIH226 人肺鳞癌细胞NCIH226
YS1245 NCIH23 人肺腺癌细胞NCIH23
YS1246 NCIH2452 人胸膜双相间皮瘤细胞NCIH2452
YS1247 NCIH292 人肺癌细胞(淋巴结转移)/肺粘液表皮样癌NCIH292
YS1248 NCIH295R 人肾上腺皮质细腺癌细胞NCIH295R
YS1249 NCIH358 人非小细胞肺癌细胞P53缺失NCIH358
YS1250 NCIH446 人小细胞肺癌细胞NCIH446
YS1251 NCIH460 人大细胞肺癌细胞NCIH460
YS1252 NCIH520 人肺鳞癌细胞NCIH520
YS1253 NCIH524 人非小细胞肺癌细胞NCIH524
YS1254 NCIH661 人大细胞肺癌细胞NCIH661
YS1255 NCIH82 人小细胞肺癌细胞NCIH82
YS1256 NCIH929 人骨髓瘤细胞NCIH929
YS1257 NCIN87 人胃腺癌细胞NCIN87
YS1258 NCIN87/LUC 人胃腺癌细胞NCIN87/LUC
YS1259 ncm460 人正常结肠上皮细胞ncm460
YS1260 NK92 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞NK92
YS1261 NK92MI 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞NK92MI
YS1262 NOZ 人胆囊癌细胞NOZ
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