抗体快速偶联标记碱性磷酸酶快速标记试剂盒

产品名称                                                  

碱性磷酸酶快速标记试剂盒

产品货号                                                  

ZXLA-800B

包装规格                                                                                          

1次标记/盒（0.5mg蛋白/次标记）

预期用途                                                 

用于含伯氨（NH2-）的抗体、蛋白、细胞、核酸、激素、抗生素、生物碱等分子的碱性磷酸酶快速标记。适用于化学发光、Elisa、免疫印迹（WB）、免疫组化、细胞学、单分子等免疫检测系统。

标记原理                                                 

本试剂盒采用高活性的碱性磷酸酶活化物质，结合简约高效的滤过装置，实现对各类物质进行碱性磷酸酶的快速标记。待标记分子上的伯氨基（NH2-）经特异性修饰，过量游离的修饰成分通过试剂盒配套的滤过装置去除。后与试剂盒中已处于高活化态的碱性磷酸酶有效成分形成稳定的偶联物。偶联物收集后可直接使用或根据需要进行凝胶过滤提纯后使用。

主要组成成分                                             

(1) R1试剂：处理剂      1支

(2) R2试剂：碱性磷酸酶  1支

(3) B1试剂：置换液      1支

(4) B2试剂：清洗液      1瓶

(5) M1设备：滤过浓缩管    1支

下列试剂或仪器标记操作时需要，但不包含在本试剂盒中：

(1) 移液器：10μL、200μL、1mL

(2) 37±1℃水浴锅或培养箱

(3) 震荡仪

(4) 离心机

储存条件及有效期                                         

(1) 储存有效期：2～8℃条件下，有效期为12个月；

(2) 试剂盒开封后，未溶解使用的R2试剂≤-20℃保存；

(3) 生产日期和使用期限：详见产品外包装标签。

标记方法和步骤                                          

(1) 实验前准备

1) 请仔细阅读本说明书，本试剂盒可进行1次标记实验，每次标记实验的最佳标记量为0.5mg，可接受标记量为0.4-0.6mg。

2) 将处于冷冻或冷藏状态的待标记物提前恢复室温。

3) 将R1试剂进行瞬时离心以确保固体物处于管底。

4) 请打开水浴锅或培养箱，并设置工作温度为37±1℃。

(2) 标准操作方法

1) 取1支滤过浓缩管垂直放在离心管架上，使用移液器分别加入200 μL置换液（B1试剂）和0.1mg待标记蛋白，轻轻吹打混匀，TIP头不要触碰到液体底部的滤膜；

注意：①如果0.5mg的待标记蛋白体积＞300μL时，先使用上述滤过浓缩管浓缩至＜300μL后，再加200 μL处理液；

2) 8000 g离心5min，弃废液（滤膜上若仍有残留液体可适当延长离心时间以除尽）；使用移液器加入200 μL置换液，轻轻吹打混匀，垂直放在离心管架上备用；

3) 取1支处理剂（R1试剂）垂直放在离心管架上，加入1mL 清洗液（B2试剂），震荡混匀后立即取15μL加入步骤2）中备用的滤过浓缩管内，轻轻吹打混匀；

4) 用封口膜将滤过浓缩管密封并置37℃±1℃孵育40min；

5) 8000 g离心5min，弃废液，滤过浓缩管内加入300 μL清洗液（B2试剂），轻轻吹打混匀、离心；重复该步骤3次；

6) 滤过浓缩管内加入200 μL清洗液，备用。

7) R2试剂（碱性磷酸酶）冻干粉使用200 μL纯水充分复溶，后全部转移至步骤6）备用的滤过浓缩管内充分吹打混匀。

8) 用封口膜将滤过浓缩管密封并置37℃±1℃孵育40min；

9) 使用移液器连续轻轻吹打20次以充分回收标记物。将滤过浓缩管内溶液全部转移至冻存管内。此回收溶液即为标记了碱性磷酸酶的蛋白溶液，可根据需要进行下一步实验应用或保存。

常见问题解释                                           

(1) 哪些蛋白或分子可以使用本试剂盒进行生物素标记？

      条件①：待标记蛋白分子量需要＞30 kD；

条件②：待标记蛋白需要含伯氨（NH2-）结构。

满足以上两个条件的蛋白均能使用本试剂盒标记。若待标记物不满足以上条件，请选择本公司其他规格的标记试剂盒。

(2) 本试剂盒可标记多少mg蛋白？

      本试剂盒可进行1次标记实验，每次标记实验的最佳标记量为0.5mg。即可以做1次标记实验，一共可标记0.5mg蛋白。如果需要标记的蛋白量更大，请选择本公司其他规格的标记试剂盒。

(3) 本试剂盒标记后的蛋白储存条件？

长期保存≤-20℃；短时间内（≤7天）2-8℃保存。

如有需要，请选择本公司推荐的碱性磷酸酶标记蛋白保存液。

(4) 本试剂盒标记后的蛋白稳定性如何？

使用本试剂盒标记的碱性磷酸酶单克隆抗体，经免疫检测平台验

证，具有较好的热稳定性和实时稳定性；此外，标记产物的稳定性

与蛋白本身的稳定性也有关系。如需要提升标记产物的稳定性，可

实验室自行筛选含稳定成分的缓冲液，也可选择本公司推荐的碱性

磷酸酶标记产物稳定缓冲液。

(5) 如有其他问题请联系本公司技术支持。

注意事项 

(1) 使用前请仔细阅读本说明书。如有疑问请先与技术支持确认，再开始标记实验！

(2) 请在通风良好的实验室内使用本试剂盒。

(3) 使用本试剂盒进行标记实验产生的废液请及时密封、处理。

(4) 本试剂盒仅限于科学研究领域的专业人员使用。

(5) 本试剂盒仅供实验室研究使用，不得用于临床诊断或临床治疗，不得用于食品或药品，不得储存在普通民房住宅内。

(6) 使用本试剂盒时，请穿实验服并佩戴口罩和一次性手套。

基本信息                                                  

无锡子晓生物科技有限公司         

Wuxi ZIJOY Biotechnology Co., Ltd

地址：无锡市惠山区智慧路1号4号楼             

技术支持：2076028640@qq.com

网址：www.zijoybio.com

订货热线：17200902831

 *本试剂盒仅供实验室研究使用！                                            20230428A

本公司供应抗体蛋白快速标记试剂盒目录

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