aladdin 阿拉丁 A579380 巴西芬净 127785-64-2 98%

中文名：金担子素 (1 mg/mL)

英文名：Aureobasidin A (1 mg/mL)

纯度：BioReagent，用于显微镜，无菌，≥98%，1.0 mg/mL, 溶剂：无水乙醇，Microbial culture

货号：A1524600

Cas号：127785-64-2

存储温度：-20°C储存

运输条件：超低温运输

稳定性存储：Store at -20℃ long term (24 months).

产品介绍：

Aureobasidin A (金担子素)，是从丝状 真菌 Aureobasidium pullulans No. R106 中分离出来的环酯肽类抗生素，是一种很强的抗真菌抗生素。在较低的浓度下 (0.1-0.5 μg/mL) 可对酵母产生毒性，对其敏感的真菌包括：酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae)、裂殖酵母 (Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌 (Candida glabrata)、构巢曲霉 (Aspergillus nidulans) 和黑曲霉 (A. niger)。作用机制：AbA 抑制酵母中 AUR1 基因 (1,2) 编码的肌醇磷脂酰胺 (IPC) 合成酶的活性，AUR1 基因的突变形式 AUR1 C 的表达使酵母对 AbA 产生抗性。利用 AUR1-C 基因作为蛋白质互作的报告基因可降低仅用营养报告基因 (如 HIS3) 进行低严紧度初筛时产生的假阳性背景。由于 AbA 可以直接杀死敏感的酵母菌株，而不是只抑制菌株生长，所以基于 AbA  的筛选可降低酵母互作的假阳性。一般实际操作中，用低浓度的 AbA 进行初筛时会获得很多克隆，之后再提高筛选严谨度，比如用 4 个报告基因 (AUR1-C,HIS3, ADE2 和MEL1) 或提高 ABA 筛选浓度进行高严谨度的二次筛选以确认阳性克隆。

产品组分与配方：   

操作方法

1、Y2HGold (pGBKT7+pGADT7) 双杂系统：Y2HGold 菌株基因组中整合了 AbA 抗性基因 AUR1-C，Y2HGold 有四 个报告基因：AbAr，HIS3，ADE2，MEL1，当蛋白互作时会激活这四个报告基因的表达。酵母双杂的自激活验证和筛选试验中 AbA 的常规使用浓度为 125-200ng/ml。在做酵母双杂试验之前应对Bait质粒进行自激活验证，初始 AbA 浓度可以用 125ng/ml，若没有自激活，可将此浓度作为后面双杂试验时的筛选浓度，若有自激活可以提高 AbA 浓度，直到 Bait 质粒没有自激活为止，但 AbA 浓度最高不要超过 1000ng/ml (若超过此浓度仍然有自激活，说明酵母细胞中有内源转录因子或其他分子可以识别Bait质粒，激活 AUR1-C 基因，这种试验结果是不准确的)。 若酵母筛库试验中获得的阳性菌落太少，可以适当降低筛库时的AbA浓度到 100ng/ml。 

2 、Y1HGold（pAbAi+pGADT7）单杂交系统：Y1HGold 菌株基因组本身没有整合 AbA 抗性基因 AUR1-C，在 pBait AbAi 经线性化整合到 Y1HGold 基因组后变成 Y1HGold[Bait/AbAi] 菌株，此菌株含有报告基因：AbAr，当蛋白与 DNA互作时会激活 AUR1-C (AbAr) 基因的表达。酵母单杂的自激活验证和筛选试验中AbA的常规使用浓度为 100- 200ng/ml。在做单杂试验之前应对 Bait 质粒进行自激活验证，初始 AbA 浓度可以设置为：100ng/ml\、150ng/ml、200ng/ml，若均没有自激活，可选最低浓度作为后面单杂试验时的筛选浓度，若有自激活可以提高 AbA 浓度，直到 Bait 质粒没有自激活为止，但 AbA 浓度最高不要超过 1000ng/ml (若超过此浓度仍然有自激活，说明酵母细胞中有内 源转录因子或其他分子可以识别报告基因，激活 AUR1-C 基因，这种试验结果是不准确的)。单杂的自激活验证可先将 菌液浓度调整到 OD600=0.2， 再稀释100倍到 0.002，取 100ul涂相应AbA浓度平板即可

3、 倒平板：酵母用固体培养基微波炉加热融化后或高压灭菌后冷却至55℃以下， 若配制 125ng/ml 的 AbA 平板，每 100ml 培养基加入 12.5ul 1mg/ml 的 Aureobasidin A 溶液混匀倒平板即可； 若配制 200ng/ml 的 AbA 平板，每 100ml 培养基加入 20ul 1mg/ml 的 Aureobasidin A 溶液混匀倒平板即可。

产品参数：

 CAS：127785-64-2

 英文名称：Aureobasidin A 

分子量：1101.13 

分子式：C₆₀H₉₂N₈O₁₁

纯度：≥98.0% 

固体外观：白色粉末 

溶解性：易溶于乙醇 

注意事项 

1、不开封的 Aureobasidin A 溶液（过滤除菌）可在-20℃保存两年，开封后若发现染菌，停止使用。

2、本产品仅供专业人员科研使用，不得用于临床诊断或治疗。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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