产品名称：黄递酶 (DPH)

规格或纯度：生物活性, ActiBioPure™, 高性能, EnzymoPure™, ≥90%(SDS-PAGE), ≥600 U/mg powder

产品介绍：

用途: 用于β-羟丁酸试剂的研发和大量配制。 

酶学性质

来源：微生物 

分类：EC 1.6.5.2 

分子量：28 kDa (SDS-PAGE) 

等电点：5.2 

Km 值：7.4 ×10^-4 M (NADH)，6.0×10^-2 M (NADPH) 

抑制剂：Fe3+, Mn2+, Cu2+ 

最适 pH：7.5                                       图 1

最适温度：45℃                                       图 2

pH 稳定性：4.5-9.0 (25℃, 16 h)                                       图 3

热稳定性：50℃以下稳定 (pH 7.5, 30 min)                                       图 4

稳定性：-25~-15℃静置保存 12 个月保持90%以上活性                                       图 5

保护剂：FMN, NAD(P)H

Buffer solution: pH 4.5-5.5, acetate buffer; pH 6.0-8.0, 

Na-phosphate; pH 8.0-9.0, Tris-HCl; pH 9.0-10.0,

 Glycine-NaOH.

Reaction in 200 mM Tris-HCl buffer pH 7.5. 

Enzyme concentration: 1 mg/mL

25℃, 16 h-treatment with 50 mM buffer solution: pH 4.5-5.5, acetate buffer; pH 6.0-8.0; Na-phosphate; pH 8.0-9.0, Tris-HCl; pH 9.0-10.0, Glycine-NaOH. Enzyme concentration: 1 mg/mL

30 min-treatment with 200 mM Tris-HCl buffer, pH 7.5. Enzyme concentration: 1 mg/mL

活性测定方法

1、原理

DCPIP（二氯酚靛酚）的量可用紫外可见分光光度计在600 nm下检测。 

2、酶活定义 

单位酶活定义为在下述反应条件下，每分钟消耗1μmol DCPIP所需的酶量。

3、试剂准备

试剂 I：200mM pH 7.0 Tris-HCl缓冲液。 

试剂 II：36 mM NADH溶液（用水溶解，现配现用，置于冰上）。 

试剂 III：2.4 mM DCPIP（用水溶解，室温放置，现配现用）。

试剂 IV：200 mM Tris-HCl，pH 7.5，含0.5% Tween20。 

待测样品：用试剂 IV将酶液稀释至0.1-0.25 U/mL。  

4、操作步骤

4.1. 在3 mL比色皿中加入2.4 mL水，0.3 mL 试剂 I，0.1 mL试剂 II，37℃预热4 min。 

4.2. 加入0.1 mL待测样品，0.1 mL DCPIP，迅 速混匀。 

4.3. 在600 nm处，1分钟内吸光度的变化率 ∆As。 

*用酶稀释液替代酶液，其它步骤相同，所得溶液吸光度为空白吸光度（∆Ab）

∆A=∆As-∆Ab 

5、 活力计算

Vt：反应液总体积 (3.0 mL)； 

Vs：酶液体积 (0.1 mL)； 

1.0：光路长度 (cm)； 

df：稀释倍数； 

C：酶浓度 (mg/mL)； 

20.9：标准反应条件下，生色基团 600 nm处毫摩尔吸光系数 (cm2/μmol)。

生物活性：≥600 U/mg powder

Accession #：P0A8G6,P0AGE6,P0A754,P39315,P0A756

预测分子量：28 kDa (SDS-PAGE)

级别：生物活性, ActiBioPure™, 高性能, EnzymoPure™

浓度：≥600 U/mg powder

储存条件：避光,-20°C储存,干燥,避免反复冻融

运输条件：超低温运输

稳定性与储存：长期储存-20℃（18个月）；复溶后建议分装，避免反复冻融；避光；密封。

CAS编号和信息：9001-18-7

酶学委员会编号：EC 1.6.5.2

Accession #：P0A8G6,P0AGE6,P0A754,P39315,P0A756

生物活性：≥600 U/mg powder

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