ActSep? CD3/CD28激活磁珠

ActSep® CD3/CD28激活磁珠（ActSep®CD3/CD28 Activation Magnetic Beads），GMP级

产品货号：GMP-TL601

♦ 产品描述（Description）

 ActSep®CD3/CD28激活磁珠提供了一种不需要抗原呈递细胞就能激活和扩增T细胞的简单方法。通过在磁珠上偶联抗CD3和抗CD28单克隆抗体，提供T细胞激活和扩增需要的初级和协同刺激信号，实现T细胞的激活和扩增。

♦ 产品特点（Advantages）

1、4.5um磁珠与细胞大小匹配

2、T细胞活化无需滋养层细胞

3、产品表现稳定，对细胞损伤小

4、9-14天可扩增100倍以上

5、ISO13485医疗器械质量管理体系认证

♦ 浓度（Concentration）

2×108beads/ml

♦ 反应种属（Reaction Species）

人

♦内毒素（Endotoxin）

<2EU/mL

♦ 适用范围

T 淋巴细胞

♦ 保存温度（Storage Temperature）

2~8℃

♦ 使用方法（Usage method）

一、ActSep®CD3/CD28激活磁珠的清洗：

1.1 重悬磁珠（涡旋超过30s，或者颠倒混匀5min）；

1.2 按实际用量需求，将确定体积的磁珠转移至离心管中；

1.3 加入等体积的含1% HSA的PBS缓冲液，若磁珠体积小于1 mL，则加 l mL含1% HSA的PBS缓冲液，进行重悬润洗，吹打或涡旋；

1.4将上述装有重悬磁珠的离心管放在磁力架（磁珠专用）上，静置1min，弃去上清，注意不要吸取到磁珠。

1.5于上述离心管中加入与1.2等体积的含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基重悬磁珠备用。

二、磁珠激活和扩增 T细胞

2.1 用含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基调整T细胞密度至1~1.5×106cells/mL，将调整好密度的细胞置于细胞培养容器中。

2.2按照磁珠和T细胞数量比例（推荐比例范围为1:1 ~ 3:1。在实际应用中，客户可根据实际情况摸索调整），将上述1.5重悬的磁珠按比例加入铺好细胞的培养容器中。

2.3将上述培养容器置于37℃，5% CO2培养箱中培养。

2.4根据实验需求，可在培养阶段对活化的T细胞进行进一步分析（取样后，去除磁珠并对细胞进行流式检测）。

2.5逐日观察细胞状态，建议每周至少两次对细胞进行取样计数，并定期补液。

2.6当细胞密度超过2.5×106cells/mL或培养基变黄时，调整细胞密度至0.5~1×106cells/mL。将细胞培养至适宜时长后（一般12~14天）即可收获细胞。

2.7若培养时间需延长，可考虑通过对细胞再刺激培养，具体如下：

2.7.1重新刺激前，将细胞转至干净的无菌离心管中，用磁力架（磁珠专用）去除使用过的磁珠。

2.7.2将含有细胞的悬液转至新的离心管中，用含有200 IU/mL rhIL-2的完全培养基调整T细胞密度至0.5~1×106cells/mL。

2.7.3重复磁珠清洗、磁珠激活和扩增T细胞的步骤。细胞培养至适宜天数后，可去除磁珠收获细胞。

注意事项：

1.细胞扩增后需定期轻轻吹打培养容器中的细胞悬液，以便充分分散磁珠和细胞。

2.培养过程中，可以每2~3天进行细胞计数，细胞计数前均需去磁，去磁过程：将细胞培养器中的细胞混悬均匀后取样至离心管中，将其放在磁力架（磁珠专用）上，静置1min，取上清至新的离心管。

3.培养过程中可通过流式细胞术对T细胞的表型、活化状态进行检测。

♦ 实验数据（Experimental Data）

♦ 参考文献

Donor-Derived CD7 Chimeric Antigen Receptor T Cells for T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia: First-in-Human, Phase I Trial

影响因子：44.54

 ♦ 注意事项

1.细胞扩增后需定期轻轻吹打培养容器中的细胞悬液，以便充分分散磁珠和细胞。

2.培养过程中，可以每2~3天进行细胞计数，细胞计数前均需去磁，去磁过程：将细胞培养器中的细胞混悬均匀后取样至离心管中，将其放在磁力架（磁珠专用）上，静置1min，取上清至新的离心管。

3.培养过程中可通过流式细胞术对T细胞的表型、活化状态进行检测。

   注意：For research and manufacturing use.