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纳米抗体技术发现平台

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天津 更新日期:2024-10-11

泰克生物科技(天津)有限公司

非会员
联系人:江志华
电话:18920585432拨打
手机:18920585432 拨打
邮箱:info@tekbiotech.com

产品详情:

中文名称:
纳米抗体技术发现平台
产品类别:
服务

泰克生物着力于为客户提供高质量,且具性价比的抗体药物前期发现技术服务。我们在药物抗体发现方面拥有10年的项目开发经验和心得,积累了充足的抗体定制和重组蛋白生产经验。基于噬菌体展示技术(Phage Display Technology)平台的服务,泰克生物能够为客户提供一系列包括但不限于兔源、鼠源、羊源、驼源及牛源等不同物种的单克隆抗体制备服务,及其配套的完整可追溯性文件体系。

噬菌体展示技术(又纳米抗体技术)是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,通常为M13噬菌体的P3蛋白,使外源基因随外壳蛋白的表达而展示到噬菌体表面的生物技术。噬菌体展示的优势在于其展示文库中变异抗体基因的多样性,各个重组噬菌体(常用噬菌体为M13噬菌体)表面展示出不同的抗原结合域,相较于传统杂交瘤方法,噬菌体展示技术在抗体基因展示与筛选层面则具有非常突出的效率优势(如杂交瘤融合效率一般<0.4%,即1000次融合细胞中,大概4个融合子;而噬菌体展示轻松可以获得108-109个正确抗体序列)。


█ 噬菌体展示抗体文库构建服务

 

泰克生物可为客户提供驼源VHH纳米抗体库,scFv抗体库,Fab抗体文库构建以及筛选服务。其中VHH纳米抗体库,又称为驼源重链抗体文库,抗体分子量大小为15kDa,是驼源动物产生的特有的一种抗体。目前被广泛应用于CarT/Car-NK治疗性的驼源VHH抗体(又被称为纳米抗体)噬菌体展示发现路径如图1所示:

企业微信截图_16697866974388.png

1基于噬菌体技术平台的驼源VHH抗体发现服务



泰克生物还可以提供一系列的抗体验证服务,例如:通过GST pull-down或CO-IP策略检测展示的蛋白质与其他分子之间的相互作用或分离特定目标、抗原抗体BLI亲和力测定、细胞功能验证及细胞系体外验证等。

泰克生物提供的抗体库具有丰富的多样性和规模,是筛选所有抗原类型以及选择具有高亲和力的功能性抗体的理想选择。凭借多年的经验,我们开发了多种噬菌体平台,可以为您定制特定的文库。如果您有兴趣开展噬菌体展示抗体项目,或者其他相关服务,例如抗体测序、scFv、Fab和Fc 融合蛋白等,请联系我们!


█ 服务内容和周期

 


步骤

服务内容

QC标准

周期

Step1:蛋白表达

(1) 密码子优化+基因模板合成+表达载体构建;

(2) 质粒抽提+转染(哺乳表达系统)目的蛋白检测(WB,SDS-PAGE);

(3) 蛋白表达放大+蛋白亲和纯化;

交付:表达载体,克隆甘油菌,重组蛋白3-3.5mg,纯度>85%,标准实验报告

 

4-6周

Step2:动物免疫

(1) 动物免疫4次,加强免疫一针,共计免疫5针;

(2) 免疫前采集阴性血清,第4针采血进行ELISA检测血清效价;

(3) 若第4针血清抗体效价(蛋白抗原>105;多肽抗原>104)满足要求,则采血前7天再次加强免疫1针,如不满足要求,则继续常规免疫;

(4) 效价合格,采血分离单核细胞;

动物:背景清晰(年龄,性别,防疫情况);

免疫:蛋白抗原>105;多肽抗原>104

采血:数量100ml以上;

PBMC细胞:>105/vial

 

8-10周

Step3:模板cDNA制备

(1) PBMC总RNA提取(RNA提取试剂盒)

(2) 高保真RT-PCR制备cDNA(反转录试剂盒)

cDNA:反转后>1ug/ul,胶图分布均匀;

cDNA模板总量>150ug;

1 天

Step4:噬菌体展示文库构建

(1) 以cDNA为模板,两轮PCR法扩增VHH基因;

(2) 噬粒构建与转化: VHH基因拼接噬菌粒载体,电击转化TG1宿主菌,构建抗体库,混合建库电击次数不低于30次(单靶点建库,电击次数不低于15次);

(3) 鉴定:随机挑选24个克隆,PCR鉴定阳性率+插入率

(4) 辅助噬菌体准备:M13噬菌体扩增+纯化;

(5) VHH展示文库救援

文库阳性率:>90%;

文库插入性率:>90%;

库容:>108

1-2周

Step5:文库筛选(3轮筛选)(固相筛选)

(1) 抗原包被(单个蛋白筛选,常规默认是固相筛选法或磁珠分选;细胞筛选方法需要单独核算费用);

(2) 默认3轮筛选:压力筛选,限度去除非特异性抗体;

(3) 挑取96个克隆扩增噬菌体+IPTG诱导表达+ELISA检测阳性克隆;

(4) 挑取全部阳性克隆进行基因测序(>20个,多达96个);

ELISA阳性标准:P/N>3;

VHH筛选标准:CDR氨基酸序列不同

2-3周

Step6:抗体验证(体外验证)

(1) 将获得的抗体序列构建合适的表达载体进行表达+亲和纯化+抗体蛋白定量;

(2) Elisa验证抗体与抗原结合,进行下游验证(交付EC50数据);

(3) BLI法验证抗体亲和力;

(4) 细胞功能验证:流式验证;

(5) 验证细胞系(抗原受体过表达细胞系);

交付:表达载体,克隆菌株,表达菌株,重组抗体蛋白1mg,纯度90%;

快速亲和力测定结果;

4-6周



█ 服务优势

 

✔ 物种适应性广泛:人,鼠,兔,羊,羊驼,骆驼,鱼等物种的单抗开发均兼容(不适用牛源单抗开发)

✔ 技术平台成熟:噬菌体展示技术提供1级免疫文库的建库库容为108-109,插入率均满足>95%,筛选获得的抗体亲和力普遍处于nM- pM级别

✔ 开发周期短:获得PBMC后,建库到筛选获得抗体序列,3-4周

 产品交付标准高:针对免疫库,交付免疫前后血清,抗体展示文库,筛选洗脱产物,抗体序列

✔ 文库淘筛定制化(噬菌体展示方式):根据客户需求不同以及靶点性质不同,会设计不同的筛选方法,如固相,固相/液相和细胞筛选

✔ 实验记录可追溯:QC质控标准(含RNA提取,cDNA制备等),中英文实验报告,手写实验记录本 







抗体噬菌体展示技术;噬菌体抗体库;噬菌体文库制备;纳米抗体技术发现平台;

公司简介

泰克生物科技(天津)有限公司致力于为全球客户提供基于噬菌体展示和纳米抗体研发平台的定制服务,泰克生物的研发团队在抗体发现、重组抗体开发和噬菌体文库构建和筛选方面拥有丰富的经验。我们的服务包括使用各种抗体库技术(包括噬菌体展示、细菌展示和酵母展示)生产人、猴、兔、牛、羊、羊驼和骆驼单克隆抗体。此外,泰克生物拥有的抗体发现和噬菌体平台可以提供:抗体偶联药物发现服务、CAR候选分子发现服务以及相关的抗体测序和亲和力测定服务;纳米抗体文库构建与筛选服务,噬菌体文库构建和筛选服务以及抗体亲和力成熟等相关服务。 泰克生物的科学家致力于为战胜癌症以及各种疾病提供生物学研究方法和服务。泰克生物的科学家认为,建立以客户服务为中心的运营模式对于优化药物开发流程、,同时组建不同研究领域背景的团队进行未来的药物发现和癌症研究具有重要意义。泰克生物的这一长期发展目标激励着我们为客户提供优质的技术服务和研究成果。

成立日期 (7年)
注册资本 500万
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 100万以内
经营模式 试剂,定制,服务,试剂,定制,服务
主营行业 生化试剂,生化试剂,抗体,抗体,蛋白组学,蛋白组学,分子生物学,分子生物学,免疫安全,免疫安全

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