Bio-FIREFLYGLO 萤光素酶报告基因检测试剂盒

产品简介：

Bio-FIREFLYGLO萤光素酶报告基因检测系统是一种辉光型定量检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点，可以满足高通量检测萤光素酶在哺乳动物细胞中的表达。相比于美仑辉光型FIREFLYGLO 萤光素酶报告基因检测试剂盒（MA0519），本品发光信号强度大幅度提升，有效提高了检测灵敏度，可以用于检测ADCC Reporter Bioassay或细胞中萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因的表达。

操作说明：

数据展示:

图1. Bio-FIREFLYGLO发光体系在光强以及线性效果对比进口P品牌（萤光素酶水平检测）。

(A)Bio-FIREFLYGLO萤光素酶报告基因检测试剂盒对比进口P公司，在绝对光强上赶超竞品P。(B) 单一时刻光强-Firefly萤光素酶浓度标曲线性良好（R²=0.9996）。

图2. Bio-FIREFLYGLO发光体系在光强以及线性效果对比进口P品牌（细胞水平检测）。

(A)细胞浓度梯度光强稳定性和(B)细胞浓度-光强标曲示例。在细胞培养基环境中，原位追踪检测Firefly Luciferase发光情况。由图可知，在绝对光强上赶超竞品P；而且，单一时刻光强-细胞数标曲线性良好（R²=0.9998）。

图3. Bio-FIREFLYGLO发光体系在不同培养基发光情况。美仑Bio-FIREFLYGLO发光体系在常用培养基如：DMEM、RPMI1640、DMEM/F12都可以正常发光，均与对照检测效果相近。

图4：293T细胞中TNFα浓度梯度诱导NF-κB通路检测效果，Meiluncell Bio-FIREFLYGLO对比竞品P。归一化处理后，TNFα浓度梯度诱导NF-κB通路检测结果与竞品无明显差异。

图5：使用PWL110检测萤光素酶发光情况。Jurkat-luc2p-NFAT-RE-hyg细胞经过PMA以及离子霉素药物处理，激活萤火虫萤光素酶，使用PWL110检测不同药物浓度下处理后的发光情况，计算出EC50=3.278ug/ml。

图6：使用PWL110进行CD20抗体的ADCC效应检测。效靶细胞比例为6:1，EC50=34.76ng/ml。靶细胞为Raji，效应细胞为Jurkat-luc2p-NFAT-RE- FcγRIIIa-high affinity(V158)。

图7：AML12细胞转染IL6-promoter-Luc荧光素酶报告基因质粒，加入LPS诱导IL-6炎症通路。Meiluncell Bio-FIREFLYGLO对比竞品P检测结果无明显差异。

保存条件：

全新试剂盒-20℃保存，一年有效；

溶解分装后的Bio-FIREFLYGLO Luciferase Substrate于-70℃避光保存一年，或-20℃短期保存不超过一个月。

运输条件：-10℃干冰运输。

注意事项：

1、检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品，不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。

2、由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。

3、酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养板平衡至室温。

4、为保证萤光素酶检测试剂稳定性，适量分装后建议-70℃长期避光保存或者短期存放于-20℃不超过一个月，并尽快使用，尽量避免多次反复冻融。

5、如需同时检测多个细胞培养板，请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致，再进行数据读取，以获得的检测结果。