Myco-Zero?支原体去除试剂

碧云天生产的Myco-Zero™支原体去除试剂，英文名称为Myco-Zero™ Mycoplasma Removal Agent (MRA)或Myco-Zero™ Mycoplasma Elimination Reagent，简称Myco-Zero™，是一种用于快速、高效去除细胞培养过程中广泛存在的支原体污染的非抗生素类试剂。本产品是一种真正能 去除、杀灭支原体的试剂，去除后即可撤去，无须长期维持，适合各种被支原体污染细胞、病毒及相关试剂的处理，特别适合被支原体污染的珍贵细胞或已污染支原体但需要保种细胞的支原体去除。本产品与Minerva Biolabs公司的Mynox®为同类产品，效果基本一致。

支原体(Mycoplasma)是最小、 的原核生物。支原体有如下特征：支原体无细胞壁结构，所以针对细胞壁的许多常见的抗生素，如青霉素或β-内酰胺类抗生素对支原体无效；支原体大小介于细菌和病毒之间，约为0.2-0.8μm，所以部分支原体可通过0.22μm滤器，常规的过滤对支原体无效；很多支原体由于自身的生物合成能力有限而依靠宿主提供营养，所以通常吸附或散落在细胞表面和细胞之间。支原体的这些特征使细胞培养过程中存在支原体污染的风险，细胞的支原体污染已经成为一个 性的普遍问题。支原体污染可能会严重影响细胞的状态，使细胞的基因表达、代谢特征发生变化，导致细胞生长减缓、分化和死亡异常，严重影响细胞功能。这些影响因素会严重影响实验结果的可靠性、可重复性和一致性，因此去除支原体污染非常重要[1]。

本产品可快速、高效的清除细胞培养过程中出现的支原体， 效率近 。市售的支原体清除试剂大多是四环素类、大环内酯类和喹诺酮类抗生素，它们主要是对支原体产生抑制作用，并非直接杀死支原体，因此作用比较慢且效果不能持久[2-4]。本产品主要成分是一种多肽类表面活性剂，源自枯草杆菌发酵后的提取物。基于微生物的理化原理，Myco-Zero™选择性地与支原体膜特异性结合，改变支原体膜的通透性，从而导致支原体破裂死亡。基于该特性，支原体产生耐药的可能性极低。本产品仅需使用一次、作用5-8天即可几乎 有效地消除培养细胞中的支原体。清除支原体后，细胞可以立即恢复其自然形态和正常增殖速率。

本产品对被支原体污染的贴壁细胞HeLa和HCT-116、悬浮细胞MOLM-13和THP-1的支原体去除效果参见表1，经碧云天的Myco-Lumi™发光法支原体检测试剂盒(低灵敏度仪器用) (C0297) 检测出的支原体阳性细胞，用Myco-Zero™作用5-8天后，支原体再次检测结果为阴性，转阴后细胞状态很稳定，在传代培养至数十代的过程中细胞支原体检测始终呈阴性。支原体检测阳性的细胞转阴时间与细胞种类、细胞状态、细胞数量及支原体种类、支原体污染严重程度等密切相关，表中数据仅供参考。

表1.碧云天Myco-Zero™支原体去除试剂(C0280)对支原体阳性的HeLa、HCT-116、MOLM-13、THP-1细胞去除支原体污染前后的检测数据示例。

注1：表中的1*、2*等数字代表细胞经Myco-Zero™处理5-8天后的传代次数。

注2：碧云天的Myco-Lumi™发光法支原体检测试剂盒(低灵敏度仪器用) (C0297) 通过计算读值B与A的比值来判断是否有支原体污染。如果比值大于1.2表示有支原体污染，比值越大说明污染程度越高，如果比值小于0.9说明没有支原体污染，如果比值介于0.9和1.2之间，建议原细胞(包含原培养液)继续培养24-48小时之后再测试一次。

本产品不含抗生素，不会使支原体发生耐药反应，细胞毒性小。本产品特异性地与支原体膜结合、通过改变支原体膜的通透性从而杀死支原体。尽管Myco-Zero™在作用期间可能会对细胞的活力和形态有一定的影响，但由于本产品不能穿过真核细胞的细胞膜，因此不会改变细胞的任何特性。支原体被清除后，细胞在后续的传代过程中能快速恢复其正常的生长和增殖状态，细胞后续的生长增殖几乎无影响。本产品对细胞的增殖测试结果见图1，Myco-Zero™在作用期间可能会抑制25-50%的细胞增殖，但是传代后的细胞生长和增殖均与正常的细胞无差异。