产品名称
重组人PIN4蛋白
参阅全部 PIN4 蛋白酶
生物活性
Specific activity is > 300 nmoles/min/mg, and is defined as the amount of enzyme that cleaves 1 µmole of suc-AAFP-pNA per minute at 25°C in Tris-Hcl pH8.0 using chymotrypsin.
Activity Assay
Prepare 170 µl assay buffer into a suitable container and pre-chill on ice before use: The final concentrations are 200 mM Tris-Hcl, pH 8.0, and 20nM chymotrypsin.
Add 10 µl of recombinant PIN4 protein with 1 µg in assay buffer.
Mix by inversion and equilibrate to 1°C and monitor the A405nm until the value is constant using a spectrophotometer.
Add 20 µl pre-chilled 5mM suc-AAFP-pNA. (Substrate was dissolved in TFE that contained 460mM LiCl to a concentration of 3 mM)
Record the increase in A405 nm for 30 minutes at 25°C.
Specific activity is > 300 nmoles/min/mg, and is defined as the amount of enzyme that cleaves 1 µmole of suc-AAFP-pNA per minute at 25°C in Tris-Hcl pH8.0 using chymotrypsin.
Activity Assay
Prepare 170 µl assay buffer into a suitable container and pre-chill on ice before use: The final concentrations are 200 mM Tris-Hcl, pH 8.0, and 20nM chymotrypsin.
Add 10 µl of recombinant PIN4 protein with 1 µg in assay buffer.
Mix by inversion and equilibrate to 1°C and monitor the A405nm until the value is constant using a spectrophotometer.
Add 20 µl pre-chilled 5mM suc-AAFP-pNA. (Substrate was dissolved in TFE that contained 460mM LiCl to a concentration of 3 mM)
Record the increase in A405 nm for 30 minutes at 25°C.
纯度
> 85 % SDS-PAGE.
ab105618 was purified using conventional chromatography.
表达系统
Escherichia coli
Accession
Q9Y237-2
蛋白长度
Full length protein
无动物成分
No
性质
Recombinant
种属
Human
序列
MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMPMAGLLKGLVRQLEQFRVQQQASKMPPKG KSGSGKAGKGGAASGSDSADKKAQGPKGGGNAVKVRHILCEKHGKIMEAM EKLKSGMRFNEVAAQYSEDKARQGGDLGWMTRGSMVGPFQEAAFALPVSG MDKPVFTDPPVKTKFGYHIIMVEGRK
预测分子量
19 kDa including tags
氨基酸
1 to 156
艾普蒂生物科技(ipodix)多年来致力于重组蛋白表达与纯化的相关研究,每年可完成上百组蛋白的表达与纯化服务,拥有完整的蛋白纯化体系,可根据客户的不同需求提供多元化的蛋白纯化方案。我们可为您提供定制的蛋白纯化服务包括,有/无标签重组蛋白,天然蛋白的纯化分离等。根据蛋白性质设计亲和纯化、离子交换、分子筛、疏水等多种蛋白纯化实验方案,获得的高纯度蛋白质,可根据客户需求一对一进行个性化方案定制,能够满足蛋白质折叠、重结晶等一系列精细实验要求。
重组蛋白纯化:
重组蛋白分离纯化一般分为三种:含标签的重组蛋白纯化、不含标签的重组蛋白纯化以及包涵体变性与复性纯化。
含标签的重组蛋白纯化:组氨酸标签(His-tag)是使用范围较为广泛的一种蛋白纯化标签,其纯化的原理是组氨酸残基上的咪唑基团可与层析介质中的金属离子螯合,再通过提高缓冲液中咪唑浓度进行竞争性洗脱达到纯化效果,这种纯化标签的有点在于His-Tag的分子质量非常小且几乎不会对目的蛋白本身的生物学功能及特性产生影响,因此带有His-Tag的蛋白纯化后可直接作为抗原免疫动物制备抗体并不会影响抗体的特异性。艾普蒂生物还提供其他多种类型标签的蛋白纯化服务,如GST-Tag、SUMO-Tag、MBP-Tag等。
不含标签的重组蛋白纯化:不含纯化标签的重组蛋白我们会根据客户的样品及需求定制方案,一般会采用抗体亲和纯化方法,利用靶向配体能与目的蛋白特异性结合的特性将目的蛋白分离出来;或选用分子筛进行分离纯化。
包涵体变性与复性纯化:将以包涵体形式存在的蛋白进行变复性操作,根据蛋白质不同的性质,可以选择尿素、盐酸胍、去垢剂、极端pH等,以保证获得单体状态的变性蛋白。
艾普蒂生物提供的蛋白分离纯化流程:
步骤 | 服务内容 | 周期 |
Step1 纯化前检测与预实验 | SDS-PAGE检测蛋白情况; 小体积纯化与检测 | 1-2周 |
Step2 蛋白纯化及检测 | 大量纯化; SDS-PAGE; WB检测(视项目而定); 浓度检测 | 1-2周 |
交付 | 成品蛋白,纯化报告,图片数据; |
服务优势:
--纯化方式多元化,适合不同性质的重组蛋白;
--专业技术团队为您量身定制纯化方案,获得能够满⾜下游实验的⾼纯度蛋⽩;
--提供全面的蛋白纯化分析报告;