PEI转染试剂;线性聚乙烯亚胺PEI；线性PEI

线性化聚乙烯亚胺（简称：线性PEI）分两种分子量25K和40K。
两者区别:
1)PEI 25K转染溶液通常需要几个小时才能制备，PEI 25K含有4-1 1%的残余丙酰基，可防止聚合物主链与DNA强烈结合。
2)PEI MAX 40K完全水解(完全去乙酰化的结构意味着每批产品的表现始终如)，可以在两个小时内转化为即用型溶液。
3)PEI MAX 40K比PEI25K更易于使用，并且更高效，含更长连续性乙烯亚胺片段，其质子化氮水平比PEI25000提高11%以上。

分下面分别推荐一种简单适用而高效的方法，讲述如何配制浓度为lmg/mL的转染试剂的配制。

提前准备器材:
1 L玻璃烧杯、1 L玻璃量筒、pH计、移液器、磁力搅拌棒、带油管的真空泵
1g的PEI 25K #FSF0001或者1g的PEI MAX 40K#FSF0002、IL纯水(Milli-Q@纯水，注射用水(WFI)，或类似的生物级水)、1N氢氧化钠、25mL无菌塑料吸管、一次性0.1μm, 0.2um, 0.22μm PES真空无菌过滤器、无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。

配制过程:
1g的PEI 25K#FSF0001→900mL水溶解→搅拌、加热（60-80°C）→加HCl调pH到2.0左右→盖上烧杯，搅拌3h（直至粉末完全溶解）→冷却至室温→加NaOH调pH到6.9-7.1→移液到量筒，加水补足至1L→真空过滤消毒→分装，-20°C保存。
1g的PEI MAX 40K#FSF0002→900mL 水→溶解搅拌、加热(60-80°C)→加1N NaOH调pH到6.9-7.1→移液到量筒，加水补足至1L→真 空过滤消毒→分装， 4° C保存。
注意：加热或加酸都有助于PEI溶解（特别是配制PEI 25K，只加热溶解不了，需要适当加酸的），详细用量可试加一点搅拌看看，足够溶解就行，不一定需要加到pH那么低。

转染液贮存和保存期:
分装存放在无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶中PEI 25K溶液可在-20°C保存长达一年，部分解冻的溶液可在4°C保存2周，不可反复冻融。
PEI MAX 40K转染溶液在4° C可保持其性能至少6个月效果，稳定存放此溶液可能适用一年。不可反复冻融。

我司也提供直接配好的溶液。