试剂和器材:
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器、
6. 蒸馏水,容量瓶等
商品属性:
产品名称:Porcine E-Selectin检测试剂盒
英文名称:Porcine E-Selectin Elisa Kit
型号:EY-01P2880
规格:48T/98T
价格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
服务:可提供免费代测服务,以及产品说明书和技术指导等
保存环境:2-8℃低温、避光、防潮
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
标本要求:
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
人滑膜细胞裂解物HSL乙酸-1-萘酯(>98%,BR)质量规格:>98%,BR1-Naphthyl acetate
NCI-H838[H838]细胞,人肺癌细胞 人肺腺癌细胞,A2细胞 脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)二十八烷醇(>98%,BR)质量规格:>98%,BR1-Octacosanol
兔角膜后基质层成纤维细胞;RCBBF1-苯基-5-四氮唑(>98.5%,BR)质量规格:>98.5%,BR1-Phenyl-1H-tetrazole-5-thiol
HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 新戊二醇(>98%,BR)质量规格:>98%,BR2,2-Dimethyl-1,3-propanediol
CL-0151MDA-MB-435S(人导管癌细胞)5×106cells/瓶×21-萘酚酞质量规格:进口原装,>98%1-Naphtholphthalein
SRSV/3T3细胞,SRSV转化的3T3细胞 人胰腺癌细胞,SW1990细胞 CM-M032小鼠肠静脉内皮细胞完全培养基100mL尿酸,英文名或英文缩写:Tricyanic acid,级别:AR,98%,规格:25克
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]2-双环已基膦-2 ,6-二异炳氧基联本 95% 2-DICYCLOHqXYLPHOSPHINO-2',6'-DI-I-PROPOXY-1,1'-BIPHqNYL 787618--8
BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人细胞裂解液 (阳性对照) 偶氮录膦mA,英文名或英文缩写:CPA-mA,级别:色固,规格:100克
人少突胶质前体细胞裂解物HOPCL交替砂,英文名或英文缩写:Permutit,级别:CP,14.5%,规格:100克
IL12A & IL12B Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 120-94-5N-甲基 97%1-metxylpyrrolidine
Porcine E-Selectin检测试剂盒人细胞;Hela S3 [HeLaS3]乙二醇苯(standard for GC,≥99.5%(GC))Ethylene glycol monophenyl ether质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC)
ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) O-去甲基美托洛尔O-Desmethyl Metoprolol质量规格:美国进口
人成骨肉瘤细胞;MG-63草酸脱氢氨氯地平Dehydro Amlodipine Oxalate质量规格:美国进口
IL12A&IL27B Others Human 人 IL12A & IL27B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-氨氯地平(R)-Amlodipine质量规格:美国进口
人脐带血单个核细胞阿瑞匹坦-标记d4Aprepitant - Labeled d4质量规格:美国进口
Porcine E-Selectin检测;Porcine E-Selectin E;Porcine E-Selectin E;Porcine E-Selectin 酶;