试剂和器材:
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器、
6. 蒸馏水,容量瓶等
商品属性:
产品名称:M30检测试剂盒
英文名称:Mouse Embryonic Stem MESPU30, M30 Elisa Kit
型号:EY-01M1868
规格:48T/98T
价格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
服务:可提供免费代测服务,以及产品说明书和技术指导等
保存环境:2-8℃低温、避光、防潮
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
标本要求:
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
人前脂肪细胞-内脏HPA-v格列本脲(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Glyburide/Gliebenclamide
NCI-H1869[H1869]细胞,人肺癌细胞 人膀胱癌细胞,BIU-87细胞 人肝脏间充质干细胞HMSC-hp(标准品)质量规格:>99%,标准品Glimepiride
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)质量规格:>99%,BRGlimepiride
IgG1 Others Mouse 小鼠 IgG1-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照) 灰黄霉素质量规格:>97%,BRGriseofulvin;Fulcin
CM-R028大鼠食管平滑肌细胞完全培养基100mL灰黄霉素(标准品)质量规格:HPLC>97%,标准品Griseofulvin
T84人结肠腺癌肺转移细胞 The cell T84 of human colon adenocarcinoma of lung metastasis D-MEM/F-12培养基+5%FBS2,3-吡嗪二羧酸(>98.0%(HPLC)(T))质量规格:>98.0%(HPLC)(T)2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid
VEGFA Protein Human 重组人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白茴香偶酰(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)p-Anisil
小鼠脑膜细胞(MMC)(5×105) CNE1, 人鼻咽癌细胞系 Human苯偶酰(>99.0%(GC))质量规格:>99.0%(GC)Benzil
兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)苯偶酰 (区域精制法精制,熔段数:22)质量规格:Benzil Zone Refined (number of passes:22)
FAM3D Others Mouse 小鼠 FAM3D / Oit1 人细胞裂解液 (阳性对照) 吡哌酸(标准品)质量规格:供检查用Pipemidic acid
M30检测试剂盒人肺间充质干细胞HPMSC吡嗪酰胺Pyrazinamide质量规格:>99%,USP
REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿魏酸,柏酸,反式阿魏酸Ferulic acid质量规格:>99%,合成
大鼠食管平滑肌细胞完全培养基 100mL阿魏酸(标准品)Ferulic acid质量规格:HPLC≥98%,标准品
A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞 A7r5 rat thoracic aortic smooth muscle cells 基础培养基+5%DMSO+20%FBS安石榴苷Punicalagin (40%)质量规格:40%,BR
EGFL7 Protein Human 重组人 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 标签)安石榴甙(标准品)Punicalagin质量规格:HPLC≥98%,标准品