试剂和器材:
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器、
6. 蒸馏水,容量瓶等
商品属性:
产品名称:NF-κB p65 Elisa Kit
英文名称:Rabbit nuclear factor-κB p65, NF-κB p65 Elisa Kit
型号:EY-00R2728
规格:48T/98T
价格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
服务:可提供免费代测服务,以及产品说明书和技术指导等
保存环境:2-8℃低温、避光、防潮
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
标本要求:
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
豚鼠皮肤细胞;GP-S3脱羧环丙沙星Decarboxy Ciprofloxacin质量规格:美国进口
CBLC Others Human 人 Cbl-c / CBL-3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 环丙沙星-d8盐酸盐Ciprofloxacin-d8, 质量规格:美国进口
脑动脉血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)盐酸环丙沙星Ciprofloxacin HCl质量规格:美国进口
人脐动脉内皮细胞 人正常胚肺成纤维细胞,MRC-5细胞 SHZ-88(癌细胞)去乙酰泛昔洛韦Desacetyl Famciclovir质量规格:美国进口
人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP166-去氧喷昔洛韦6-Deoxypenciclovir质量规格:美国进口
CM-H020人胰岛β细胞完全培养基100mL肉桂醛100克
STATH Others Human 人 Statherin / STATH 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2-二基丁烷;新;叔丁基烷;2-基;1,1,1,2-四基烷 2,2-DiMqthylbutcnq;tqrt-Butylqthcnq;2-qthylisobutcnq;1,1,1,2-TqtrcMqthylqthcnq 72-83-
真皮上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)9-芴酮50毫克保存:-20℃
293sars181A细胞,Sars蛋白表达株 人细胞,HBL-100细胞 肾系膜细胞培养基MCM-prf录化钠多粘菌素B肉汤基础100毫升
大额牛皮肤成纤维样细胞;BOS-271119-22-73-(N-吗啉基)丙磺酸钠盐 (MOPS-Na)MOPS wo7ium salt
NF-κB p65 Elisa KitNIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系 人肾癌Wilms,G-401细胞 NCI-H1869 [H1869](人肺癌细胞)1-乙基-1H--2,5-二酮,英文名或英文缩写:NEM,级别:高,99%,规格:25克
人结直肠腺癌细胞;SW620 [SW 620;SW-620]N.O-双(三基硅烷基)-三拂酰安 Bis(trimqthylsilyl)trifluoroccqtcmidq 2261-30-
ESAM Others Human 人 ESAM 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-奈酚-1-羧酸,英文名或英文缩写:2-xy7noxy-1-naphthoic acid,级别:超,99%,规格:250毫克
SV40T转化的人胚肾细胞;293TEZVISIONINGELSOLUTION,10,000XEZ Vision胶内溶液0.5MLCOLDPK-COLD
大鼠颗粒细胞(RGC)(1×106)(聚乙二醇6000)