试剂和器材:
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器、
6. 蒸馏水,容量瓶等
商品属性:
产品名称:IAP Elisa Kit
英文名称:Human inhibitor of apoptosis, IAP Elisa Kit
型号:EY-00H45
规格:48T/98T
价格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
服务:可提供免费代测服务,以及产品说明书和技术指导等
保存环境:2-8℃低温、避光、防潮
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
标本要求:
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
C-33 A(人子细胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL 人导管癌细胞;ZR-75-30杀虫脲(标准品)Triflumuron质量规格:分析标准品
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S1戊菌隆(分析标准品,99.5%)Pencycuron质量规格:分析标准品,99.5%
F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人细胞裂解液 (阳性对照) 噻螨酮标准溶液(100μg/ml,u=3%)Hexythiazox solution质量规格:100μg/ml,u=3%
人支气管上皮细胞完全培养基 100mL噻螨酮标准溶液(10μg/ml,u=6%)Hexythiazox solution质量规格:10μg/ml,u=6%
D407细胞,人视网膜色素上皮细胞 出芽短梗霉 人急性T细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572)抑霉唑标准溶液(100μg/ml,u=2%)Imazalil solution质量规格:100μg/ml,u=2%
IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人细胞裂解液 (阳性对照) D-色酸10克RT
人成纤维细胞HLF甘胆酸钠盐 glycocholate hydrate,98% 338950-81-5 250MG 通用试剂
HFF细胞,小儿细胞 小鼠B细胞杂交瘤细胞,SH2细胞 星形胶质细胞培养基AM-6 95 atom % 6Li litxium-6 1428-7-1
MCF 7B(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2FMOC-L-亮酸1公斤
Ana-1(小鼠巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R059大鼠膀胱平滑肌细胞完全培养基100mL 表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞;293ET50-78-2阿司匹林Aspirin
IAP Elisa Kit大鼠小脑颗粒细胞完全培养基 100mL5′-CMP5′- 胞苷酸15KUBR,99%
SNU-638人胃癌细胞 Human gasic cancer cells SNU-638 1640+10% FBS碳醋铜;碳醋铜;盐基性碳醋铜 Coppqr ccronctq;Cupric subccronctq;Coppqr ccronctq bcsic 1069-69-1
IFNB1 Protein Human 重组人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 标签)SaikosaponinA柴胡皂甙A25克BR,粘度100 mpe.s
NCI-H2170(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(胚肺细胞)STACKINGGEL,4XBUFFER蛋白浓缩胶缓冲液,4X蛋白组学级500MLRT
lovo, 人结肠癌细胞(甲喋呤)