犬科研PCR检测试剂盒

参数规格：
产品名称：犬科研PCR检测试剂盒
型号　:　　 EY00P259
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
运输：低温
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
实验操作过程：
一、 CHO DNA 定量参考品的稀释及标准曲线的制备
用试剂盒中提供的 DNA dilution buffer 将 CHO control DNA 进行梯度稀释， 稀释浓度依 次为 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具体操作如下：
1.将试剂盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
轻微振荡混匀，简短快速离心。
2.取 6 支干净的 1.5ml 离心管，分别标记为 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分别加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后涡旋振荡混匀 5- 10s 后短时快速离心 5s，涡旋振荡和快速离心各重复 3 次。
5,按表 2 依次进行 6 次梯度稀释操作，稀释操作同步骤 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀释

二、加样回收质控 ERC 的制备
根据待测样本的残留量设置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加样浓度  (以制备加 45pg  CHO control DNA 的样本 ERC 为例)，操作如下：
1，取待测样本 100u，加至 1.5ml 干净的离心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混匀，标记为样本 ERC。
注：样本 ERC 和同批待测样本需一起进行样本前处理。
三、阴性质控 NEG 的制备

根据实验设置阴性质控，操作如下：
1，取 100ul 样本基质溶液(或洗脱液)加至 1.5ml 干净的离心管中标记为阴性质控 NEG。 注：阴性质控 NEG 样本和同批待测样本需一起进行样本前处理。
四、 qPCR 反应液的制备和加样
1，根据所要检测的标准曲线及待测样本数量，计算所需反应孔数，一般做 3 个重复孔/样。
反应孔数=  (6 个浓度梯度+1 个无模板对照 NTC+1 个阴性质控 NEG+待测样本×2) ×3 注：待测样本×2 是为了让每个待测样本检测时都同时做样本 ERC 。                  2，根据反应孔数计算本次实验所需的各组分的所需总量以制备 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反应孔数+2) ×15ul    (含有 2 孔的损失量)
10×CHO qPCR mix=  (反应孔数+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反应孔数+2) ×2ul
3，各试剂置于冰上融化，振荡混匀，按表 3 所示进行加样：
                                  表 3.各反应孔加样示例

注意事项
1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6.为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
 小鼠小胶质细胞;BV2科罗索酸（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Corosolic

PAH Others Human  PAH / PH (415 Asn/Asp) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 可可碱（标准品）质量规格：≥99%，标准品Theobromine

CM-R094大鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基100mL苦参碱(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Matrine

HEC-1A, 内膜癌细胞系 肝细胞,BRL细胞 TE 115.T(软组织纤维瘤细胞)苦参碱质量规格：≥97%,BRMatrine

小鼠细胞白血病;L12101酸氢钾(>98%,BC)质量规格：>98%,BCPotassium hydrogen tartrate

犬科研PCR检测试剂盒黄芪多糖(50%)质量规格：>50%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole  大鼠白细胞分化抗原44(CD44)ELISA检测试剂盒RatclusterOfdiffereiation,CD44ELISAKit 96T/48T  石蜡切片组织化学HRP酶联DAB间接检测试剂盒(含HRP二抗)20

黄芪多糖(30%)质量规格：>30%2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole  人CD82分子(CD82)试剂盒 Human CD82 ELISA Kit  ELISAKitsmActinin-α人横纹肌辅肌动蛋白α规格：48T/96T

3-奎宁环酮盐酸盐质量规格：>98%3-Quinuclidinone HCl  英文名称MousetelomeraseELISAKit小鼠端粒酶(telomerase)规格：96T/48T  大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

伊索拉定质量规格：≥99%,BRIrsogladine  冰冻切片平滑肌组织染色试剂盒50  人胃蛋白酶(PG)试剂盒 Human Pepsin,PG ELISA Kit

十二烷基三甲基氯化胺[离子对色谱级]IPC-DTMA-Cl质量规格：离子对色谱用试剂  英文名称HumanPICPELISAKit人I型前胶原羧基端肽(PICP)规格：96T/48T  人喋呤(MTX)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

乙酸二丁基铵(约0.5mol/L的水溶液)[离子对色谱级]IPC-DBAA (ca. 0.5mol/L in Water)质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂  动物组织氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20  小鼠肺炎支原体(MP)抗体(IgG)试剂盒 Mouse mycoplasma pneumoniae(MP)aibody(IgG)ELISA kit

二甲基亚砜(农残级)Dimethyl sulfoxide质量规格：农残级  人抗型肝炎病毒抗体(ai-HCV)ELISA试剂盒规格：96T/48T  血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒 ，英文名： TM ELISA Kit

十二烷基三甲基氯化铵（DTAC）(99%,离子对色谱级)Dodecyltrimethylammonium chloride质量规格：99%,离子对色谱级  小鼠前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒 ，英文名： PKR1 ELISA Kit  MouseCollagenaseTypeIIELISA试剂盒小鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒规格：96T/48T