埃可病毒PCR检测试剂盒

参数规格：
产品名称：埃可病毒PCR检测试剂盒
型号　:　　 EY00P398
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
运输：低温
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
实验操作过程：
一、 CHO DNA 定量参考品的稀释及标准曲线的制备
用试剂盒中提供的 DNA dilution buffer 将 CHO control DNA 进行梯度稀释， 稀释浓度依 次为 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具体操作如下：
1.将试剂盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
轻微振荡混匀，简短快速离心。
2.取 6 支干净的 1.5ml 离心管，分别标记为 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分别加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后涡旋振荡混匀 5- 10s 后短时快速离心 5s，涡旋振荡和快速离心各重复 3 次。
5,按表 2 依次进行 6 次梯度稀释操作，稀释操作同步骤 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀释

二、加样回收质控 ERC 的制备
根据待测样本的残留量设置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加样浓度  (以制备加 45pg  CHO control DNA 的样本 ERC 为例)，操作如下：
1，取待测样本 100u，加至 1.5ml 干净的离心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混匀，标记为样本 ERC。
注：样本 ERC 和同批待测样本需一起进行样本前处理。
三、阴性质控 NEG 的制备

根据实验设置阴性质控，操作如下：
1，取 100ul 样本基质溶液(或洗脱液)加至 1.5ml 干净的离心管中标记为阴性质控 NEG。 注：阴性质控 NEG 样本和同批待测样本需一起进行样本前处理。
四、 qPCR 反应液的制备和加样
1，根据所要检测的标准曲线及待测样本数量，计算所需反应孔数，一般做 3 个重复孔/样。
反应孔数=  (6 个浓度梯度+1 个无模板对照 NTC+1 个阴性质控 NEG+待测样本×2) ×3 注：待测样本×2 是为了让每个待测样本检测时都同时做样本 ERC 。                  2，根据反应孔数计算本次实验所需的各组分的所需总量以制备 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反应孔数+2) ×15ul    (含有 2 孔的损失量)
10×CHO qPCR mix=  (反应孔数+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反应孔数+2) ×2ul
3，各试剂置于冰上融化，振荡混匀，按表 3 所示进行加样：
                                  表 3.各反应孔加样示例

注意事项
1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6.为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
 髓核细胞HNPC己二酸二甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：standard for GC,≥99.5%(GC)Dimethyl adipate

9L-E细胞，前列腺癌细胞 果子狸肾上皮细胞,Hed68细胞 小鼠脑脊神经元MN-r马来酸二丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：standard for GC,≥99.5%(GC)Dibutyl maleate

KiMA(胚肾上皮细胞系) 5×106cells/瓶×2伐地那非三水合盐酸盐质量规格：>98%,三水合物Vardenafil  trihydrate

A673(横纹肌瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R011大鼠肺大动脉内皮细胞完全培养基100mL 正常肺上皮细胞;BEAS-2B伐地那非三水合盐酸盐(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Vardenafil  trihydrate

CM-H127晶状体上皮细胞完全培养基100mL抑氨肽酶,乌苯美司,贝他定，苯丁抑制素质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养Bestatin,Ubenimex

埃可病毒PCR检测试剂盒癸二酸二丁酯(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Dibutyl Sebacate  大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA检测试剂盒RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 96T/48T  人体Caveolin-1RFLP基因分析试剂盒20

癸二酸二甲酯(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)Dimethyl Sebacate  人Salusin Alpha(Salusin α)试剂盒 Human Salusin Alpha,Salusin α ELISA Kit  ELISAKitai-macrophageAb人抗巨噬细胞抗体规格：48T/96T

癸二酸二正辛酯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Di-n-octyl Sebacate  英文名称MouseF1+2ELISAKit小鼠凝血酶原片段F1+2规格：96T/48T  大鼠载脂蛋白A2(apo-A2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

三乙二醇二甲基（添加稳定剂BHT）(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Triethylene Glycol Dimethyl Ether (stabilized with BHT)  WNV(WESTNILE)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2  人雄(ASD)试剂盒 Human Androstenedione,ASD ELISA Kit

瑞他帕林;瑞他莫林质量规格：>99%,BRRetapamulin  大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA检测试剂盒RatapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T  石蜡切片KUNEL测定试剂盒10

乳果糖（标准品）质量规格：含量测定Lactulose  人E3泛素蛋白连接酶IM68(IM68)试剂盒 Human IM68 ELISA kit  ELISAKitTIMP-1人基质金属蛋白酶组织抑制因子1规格：48T/96T

酞丁安（标准品）质量规格：UV法含量测定FTIBAMZONE  英文名称MouseCystatinCELISAKit小鼠胱抑素C(CysC)规格：96T/48T  大鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒 ，英文名： TARC/CCL17 ELISA Kit

氯美扎酮（标准品）质量规格：UV法溶出度检查Chlormezanone  冰冻切片胶原纤维(GIESON)染色试剂盒50  人脊髓灰质炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA检测试剂盒HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit 96T/48T